③针刺镇痛耐受与八肽胆囊收缩素（CCK-8） 针刺镇痛耐受是指由于长时间针刺或反复多次针刺后，针刺镇痛效应降低的一种现象，或简称针刺耐受(acupuncture tolerance)。实际上，这种耐受现象在针灸临床上是常见的。常规门诊中，针灸隔日一次的治疗、每次针灸的时程、每个疗程的间隔等，均是这一现象的表现形式。目前的研究表明，电针退热过程中也有耐受现象。所以，针刺耐受应为针灸耐受 (acupuncture and moxibustion tolerance)的一部分，针灸耐受是指长时间或反复多次针灸过程中出现的针灸效应降低的现象。韩济生教授等于1979年提出 “多次电针可能引起某种程度的耐受”的观点。他们认为，既然脑内存在介导电针镇痛的内源性阿片肽，那么也就可能存在其对立面抗阿片肽。针对这一设想，经过十五年的研究，他们得出“中枢八肽胆囊收缩素是决定针刺镇痛和吗啡镇痛有效性的重要因素”、“电针镇痛有效性的个体差异决定于中枢阿片肽与八肽胆囊收缩素的相对平衡”的科学结论，其它的神经递质如5-羟色胺、去甲肾上腺素也参与针刺耐受的过程。

　　CCK-8在中枢神经系统中，抗阿片的作用及机制如图3-4。研究表明，CCK-8是对阿片作用的一种负反馈机制，不论是外源性摄入的阿片样物质，或是内源性的阿片肽，如由于电针刺激引起的阿片肽加速释放，都会作用于中枢神经系统的CCK神经元，使之释放CCK－8，从而削弱阿片样物质作用。这种反应可以看作是机体对阿片作用的一种负反馈反应，是一种自动的制约机制。不同的个体，CCK负反馈作用的速度和强度各不相同。速度越快，强度越大，则电针和吗啡的作用就越微弱（称为电针镇痛无效者或吗啡镇痛无效者），镇痛的持续时间也越短暂（容易产生吗啡耐受和电针耐受）。CCK-8抗阿片的分子机制研究表明，无论在脑或脊髓，CCK-8都有抗阿片作用，这种作用有受体特异性（抗μ和抗κ，而不抗δ阿片镇痛作用）。CCK受体与阿片受体除了在细胞膜上发生交互影响，还可以在G蛋白水平发生交互影响，继而在调节细胞内钙水平上发生相互作用，即阿片类物质抑制细胞外钙通过钙通道内流，而CCK-8可通过IP3促进胞内钙库释放出游离钙，两者的作用恰恰相反。通过这些途径，CCK-8对阿片镇痛发生对抗作用，并促进了阿片耐受的发生。

　　3、针刺镇痛的分子机制研究

　　（1）不同频率电针对中枢c-fos表达的影响：研究者采用2Hz和100Hz的电针、以c-fos表达作为神经元兴奋的标志，通过计数Fos样免疫组织化学（FIL）阳性细胞核的方法观察FOS蛋白，研究了针刺镇痛的神经通路，取得了与用经典生理学和神经药理学方法研究相同的结果。研究表明：①2Hz电针使下丘脑弓状核中出现大量的FIL，而100Hz电针信息很少到达此核；相反，100Hz电针使臂旁核中出现大量FIL细胞，而2Hz电针不引起该核团任何阳性反应。②许多核团显示出了频率响应的特异性，下丘脑的许多核团都对2Hz有较好的响应性，没有一个核团对高频有较好的响应性；而脑干网状结构的许多核团都对高频有较好的反应。③脑内的β内啡肽能神经元主要集中在弓状核，少量集中在孤束核，后者发出的纤维可下达脊髓，因此2Hz电针激活的β内啡肽系统不仅在脑内，也可能在脊髓内发挥镇痛作用。④脑干的中脑导水管周围灰质、中缝大核和中缝背核在内源性镇痛系统中起重要作用，无论是2Hz和100Hz的电针都激活这些核团，它们可能是两者共用的最后通路。⑤一般主为在刺激强度固定的情况下，频率越高则刺激越强，反应越大，但实验的结果并不支持这种假设。前脑的很多区域对高、低频率有同样强度的反应；在下丘脑和脑干的一些核团，2Hz电针引起的反应远远大于100Hz电针，表明不同脑区对不同频率信号有所偏好，也可称之为频率响应特异性。⑥有研究者将电针刺激归结为应激刺激，实际上实验中所用的电针强度是有限的(最大不超过3毫安)，对比于强烈应激刺激所引起的立即早期基因(IEGs)的表达，电针引起的反应要弱得多，中枢反应的范围也要窄得多。2Hz与100Hz的电针反应有如此明显的脑区差别，说明这不是一般的应激反应，而是有某种选择性的特定刺激。

　　（2）不同频率电针对中枢3类阿片肽基因表达的影响：研究者利用原位杂交技术，观察了电针对中枢前脑啡肽原(PPE)、前强啡肽原（PPD）、前阿黑皮素（POMC）ｍRNA 的影响。结果表明：①2Hz电针促进PPE表达的作用大于100Hz电针。②100Hz电针促进PPD表达的作用大于2Hz电针。③总的说来，2Hz电针在脑内作用广泛，但它只能促进PPE表达；100Hz电针在脑内作用范围较窄，但主要促进PPD表达，但在某些脑区也可促进PPE的表达。④两种频率的电针均未能诱导POMCｍRNA的显著增加。

　　以上研究表明不同频率电针针刺镇痛效应的差异与中枢相关基因的特异性表达有关，说明应用分子生物学理论和技术，可以从更深层次上阐明针刺镇痛的原理。

　　4、针刺镇痛原理研究的作用和意义　

    针刺镇痛原理研究，第一次用现代科学的理论和方法证明了我国传统医学针刺疗法的科学性，这极大地推动了针灸学科的现代化进程，使针灸疗法逐渐被世界主流医学所认同；同时，也促进了我国在疼痛生理学方面的研究，所以说，针刺镇痛的原理研究对促进我国生命科学的发展起到了积极作用。

　　针刺镇痛原理研究是针灸学走向世界的基础。针刺镇痛原理研究的成功推动了针灸学术的发展：（1）传统的针灸技术是可以与现代科学相融合的，只要选准研究切入点，针灸学的实践经验和观点是可以被现代科学所认识的。（2）传统针灸学所蕴含的对生命活动及疾病治疗规律性的认识，可以给研究者以独到的启示；挖掘、整理及揭示传统针灸学的科学内涵，是针灸学发展的必由之路。（3）针刺镇痛原理的研究培养了一支既有一定的传统针灸学基础又掌握现代科学理论和研究技术的针灸研究队伍，这是针灸学术深入发展的决定性因素。

　　思考题：

　　1、针刺麻醉、针刺镇痛、疼痛的概念是什么？

　　2、疼痛的性质、特点及研究的基本方法是什么？

　　3、简述疼痛的闸门控制学说及其发展。