9、抗脑缺血药  芹菜甲素及其衍生物从芹菜籽分离到芹菜甲素（L-3-n-butylphthalide）具有广谱抗癫痫作用和抗脑缺血作用，其作用机制是改善局部脑缺血区血流量，增加ATP、减少乳酸堆积，抑制iNOS合酶等，以下详述芹菜甲素衍生物ABP的抗脑缺血作用。

　　运用大鼠一侧大脑动脉阻塞模型，造成局部脑缺血，同时预防应用ABP10-20mg·kg-1，通过梗塞面积、行为功能障碍，脑含水量这几方面观察药物所起的作用，并与芹菜甲素、Nimodipine加以比较。通过实验发现上述剂量的ABP可以改善缺血后出现的行为障碍、缩小梗塞面积、降低含水量。ABP如何能减轻缺血性损伤，出现上述有益的作用？为了解药物作用环节及可能的机制，从以下几个方面进行了探讨：无论是缺血性脑损伤，还是癫痫发作，都存在胞内Ca2+紊乱的现象，钙超载将导致细胞不可逆性损伤，是细胞死亡的共同途径。用荧光指标剂Fura-2/AM，发现ABP对KCL、BayK8644引起的细胞内Ca2+升高均有抑制作用。继而运用膜片钳全细胞记录法，在豚鼠心肌细胞上，进一步证实了ABP可以抑制L-钙通道电流，并有缩短动作电位时程的作用。

　　谷氨酸是神经系统大多数突触间的兴奋性神经递质，它介导了兴奋性突触的正常活动，然而过量释放谷氨酸或谷氨酸摄取功能下降，造成突触间隙过高浓度的Glu堆积，则可使突触后神经元过度兴奋、发生溃变死亡，即兴奋毒性。缺血缺氧过程中有大量谷氨酸释放，已由许多实验证实。

　　在3×10-6mol·L-1浓度下,看到ABP对钙非依赖性谷氨酸释放有明显的抑制作用，大剂量也有抑制钙依赖性Glu释放的作用。

　　脑主要依靠摄取血中葡萄糖进行有氧氧化供能，细胞内Ca2+、其它离子梯度的正常维持，取决于能量的供给平衡。

　　预防应用抗脑缺血剂量ABP可延长小鼠断头后喘气持续时间，降低缺血后脑中乳酸（LA）的含量，并通NMR方法，在小鼠不完全性脑缺血模型中上，发现ABP有延迟ABP、Pcr耗竭，维持细胞近于正常pH值的作用。

　　脑缺血可以诱导脑内即刻早期基因的表达，如c-fos（一种细胞核内的原癌基因），并普遍认为这种表达增加与兴奋有关，与迟发性神经元死亡有关。利用MCAO模型，用Northern和Slotblotting印迹杂交技术表明，局部脑缺血确可诱导c-fos表达增强，提前应用ABP10mg·L-1，可明显地抑制c-fos基因的表达，表现形式与缺血脑保护作用相一致。

　　70kD热休克蛋白（HSP70）是对各种脑损伤，包括局部和全脑缺血作出反应而产生的一类主要应激蛋白。其作用是稳定细胞的结构，使细胞维持正常的生理功能。HPS70及其基因一定程度的诱导表达，与缺血脑组织抵抗向缺血损伤的能力有关。代表着机体对损伤耐受性的强弱，是机体内在防御机制之一。采用组织化学原位杂交这一现代新技术，在大脑动脉阻塞模型上比较缺血组和预防应用上述剂量ABP组热休克蛋白基因（hsp70mRNA）表达的强弱，并直观地观察了缺血后c-fos基因与hsp70基因表达的位置。这方面的实验结果表明，提前应用ABP，能够促进缺血后脑hsp70基因的表达，同时抑制c-fos基因表达。

　　综上所述，ABP从多个环节、不同层次呈现出对脑组织的有益作用，如对胞内Ca2+调节，对谷氨酸释放的抑制，对能量的维持，以及对原癌基因c-fos表达抑制，hspmRNA表达的促进，均为ABP具有脑保护作用提供了新的依据，同时也充分表明ABP作为预防缺血性脑损伤的新药可能有广阔的临床应用前景。

　　10、肌松剂  从我国中草药提取作用于神经肌肉接头的药物取得了一定进展。如环轮宁、汉肌松、傣肌松、八角枫碱、毛叶环藤生物碱、披针叶黄华总生物碱、溴化双托品胺，经临床试用均有一定效果。氯甲左箭毒和新傣肌松在临床上产生较满意的肌松效果。

　　三、新技术、新方法

　　药理实验方法和模型是进行药物筛选、药物作用机制研究和定量构效关系以及疾病本质探讨所不可缺少的方法，科学发展的历史已证明，无论是理论的创立还是突破，常常是昆跟在技术革新之后出现的，采用和创新药理实验方法的重要性自不待言。现简要介绍国内新技术、新方法的应用情况。

　　1、行为学方法  药物对人体和动物的作用，现已可在分子和基因水平上进行观测，但是行为学方法仍被广泛采用，而且有很大发展，行为学方法的意义在于：人的思维、认知、精神活动不能直接观察，通过动物的行为表现，可以了解药物对神经精神活动的影响和在药物作用下机体对外界刺激的应答与适应的改变。另外，药物未造成结构改变或病理损伤之前，行为学已发生变化，说明它是一种灵敏的方法。

　　学习记忆实验方法及模型已跟上国际先进水平，一是因为我国已采用国际上常用的模型和方法，再是所有仪器设备均由自己研制并实现了全部自动化。经验告诉我们：建立记忆障碍模型来观察药物作用是十分必要的，常用的许多实验方法，正常动物经一次学习即可记住和巩固下来。在采用这类实验方法的情况下，应用记忆障碍模型尤为必要。

　　近几年发展起来的“失望（despair）或不动（immobility）”行为实验用于研究抗抑郁药有较高选择性。种种冲突行为（conflictbehavior）是筛选抗焦虑药的较特异的方法。操作性条件反射与经典性条件反射的主要区别是：“强化”控制行为，而不用“条件刺激”控制行为，动物的操作取决于强化的程序，而强化再分为正性（水及食物）和负性（电击），使程序控制模式多种多样，可用于研究学习、记忆、焦虑、抑制、成瘾和鉴别药物作用性质、分类和作用机制。

　　2、递质和受体测定  80年代我国几个单位同时开展了HPLC-电化学检测器分析，测定生物样品的NE、DA、5-HT及其代谢产物DOPAC、HVA和5-HIAA，一般在20min之内即可完成，乙酰胆碱的测定除采用放免盒，还可采用HPLC-ED和GCMS等仪器设备进行检测，检测范围可达pmol水平，已逐渐取代了生物测定。

　　利用放射配基结合法测定受体的技术已被广泛应用，除用于筛选，观察药物对受体的亲和力，还用于探索新的受体、亚型和内源性配体以及纯化受体，近几年积累起来的一个经验是：许多中药对某些受体无特异性结合，但给药物数日或数周后，可使受体上调或下调，最近，有些研究工作者正在采用非放射配基的方法测定受体或受体的表达。

　　3、电生理技术  膜钳压技术用于记录细胞膜离子通道电流，是近十几年来在技术方法上的一项突出成就，它广泛用于生物学和医药学各研究领域，而且日前边成为神经药理学研究重要手段，利用膜片钳技术可以进行四种形式的离子通道电流记录，即细胞帖附式，膜外面向外，内面向外和全细胞记录，由于它们形成结构不同，各有其实际应用价值，前三种方式对研究单通道特性，确定通道类型非常重要，第四种方式由于细胞受损较小，基本上保持原有的生理功能，因而某种离子通道的变化或药物对某类通道的影响可直接通过细胞的功能表现出来，国内目前用这一技术进行检测的离子通道有Na+通道、Ca2+通道、、K+通道和Cl-通道等。