摘要 目的：通过动物实验，观察正寿王1号及2号对吗啡依赖动物模型戒断症状的影响。方法：皮下注射吗啡，建立小鼠、大鼠及犬的依赖模型，每种动物分成正常对照组、吗啡依赖模型组、生理盐水模拟治疗组及药物治疗组，观察正寿王对7种指标的影响。结果：正寿王主要作用为：明显减少吗啡依赖小鼠的跳跃鼠次（1号：P<0.01，2号：P<0.001）及其它戒断症状;减少大鼠摇头次数（P<0.01）和攻击行为（P<0.01）,对大鼠及犬体重影响不明显;此外能明显改善犬的戒断症状。结论： 正寿王具有控制吗啡戒断症状的效能。
    关键词 正寿王； 吗啡依赖； 戒断症状； 催促戒断

    正寿王为中药复方制剂,为观察其系列产品对吗啡依赖动物模型戒断症状的影响,我们建立小鼠、大鼠及犬3种吗啡动物依赖模型,并将每种动物分成不同的治疗组,通过7种指标观察,现将结果报告如下：

1 材料和方法
1.1动物
    昆明种健康♂小鼠18－22 g,平均体重为19 g±s 1.7 g；Wistar♂大鼠，120－190 g,平均体重为161 g±s 17.6 g。两种动物皆由本校实验动物中心提供。
    犬,本校实验动物中心购买的杂种犬,健康,♀♂不限,体重4－8 kg,平均体重为5.90 kg±s 1.76 kg。
1.2药品
    正寿王（1、2号）为中药复方制剂,由中国医科大学公共卫生学院毒理教研室万伯健教授提供。1号为白色细粉末,无特殊气味,不吸湿；2号为瓶装液体（浓度为20 ％）,外观为褐色、轻度透明液体，静置有黄褐色沉积粉状物,用前充分振荡混悬,4℃冰箱保存。
    盐酸吗啡注射液,每支含吗啡10 mg·ml－1, 沈阳第一制药厂出品,批号94－11－03。
    纳洛酮（naloxone hydrochlodide）,白色粉末,美国Sigma厂出品,批号51481－60－8。
    阿拉伯胶（pulvis gummi arabicim）,华美医药公司出品,批号53008。
    以上各药物的配制：正寿王1号以阿拉伯胶配成含10 ％药物的胶浆液使用。其余药品皆以蒸馏水稀释至适当浓度备用。
1.3 建立吗啡依赖模型
    基本按文献[1－4]方法, 但结合动物的实际耐受及死亡情况,大鼠和犬的首次剂量及以后每日的递增剂量明显较文献低。
1.3.1小鼠 
    皮下注射(sc)吗啡,每天两次,d1 每次40 mg·kg－1。随后逐日每次增加2 mg·kg－1,至d7剂量达每次52 mg·kg－1。d8 sc该量1次,共用药15次。
1.3.2大鼠 
    首次剂量大鼠吗啡 8 mg·kg－1(sc),每日2次。后每日每次递增4 mg·kg－1至d14剂量达每次60 mg·kg－1。
1.3.3犬 
    吗啡首次剂量 5 mg·kg－1(sc),每日2次。后每日每次递增2 mg·kg－1,至d10剂量为每次23 mg·kg－1。该量不再增加维持至d14。中途吗啡犬死亡1只。
1.4实验观察指标
1.4.1小鼠 
    小鼠跳跃试验：参考文献[1,5]方法进行,小鼠形成吗啡依赖后（小鼠于sc吗啡10－20 min出现竖尾,可持续2－4 h，随依赖形成,竖尾现象更明显）,用纳洛酮（5 mg· kg－1, sc）催促后立即将小鼠置于高35 cm，直径为30 cm圆台上,观察记录40 min内由台上跳下的鼠次数,各组间进行比较。
    小鼠其它症状情况：观察小鼠的活动及聚堆,以及大、小便和唾液分泌情况。
1.4.2大鼠 
    大鼠摇头试验：参考文献[1,6，7]方法进行。大鼠注射吗啡后期的用药间隔期（用药后5－6 h）可见摇头现象,持续数秒时间,记录每30 min摇头鼠次。
    大鼠攻击试验：参考文献[1]方法进行,致依赖后（末次用吗啡）3 d可观察到自发或诱发大鼠对阵、咬叫、互斗情况。本实验以ip有刺激性作用的药液（1 ％醋酸）引起大鼠扭体而诱发对阵及攻击现象。
    大鼠体重减少试验：实验全程及末次用药后定期定时观察各组大鼠体重变化。
1.4.3犬 
    参考文献所载猴的实验方法[1] 观察犬依赖后各种戒断症状,如：散瞳、流涎、恶心、兴奋不安、肌肉震颤、呼吸困难以及体重变化等情况。
1.5分组设计
1.5.1小鼠及大鼠 各分为4组：第1组为正常对照组,按第2组的用药方案,以生理盐水代替吗啡。第2组为吗啡依赖模型组,与第1组对照观察依赖症状指标。第3组为生理盐水模拟治疗组,用生理盐水对第2组进行模拟治疗（在小鼠竖尾实验以纳洛酮代替盐水）。第4组为药物治疗组,以正寿王1、2号对第2组动物进行药物治疗,以观察对戒断症状的影响。
1.5.2犬 分两组,第1组正常对照,第2组吗啡依赖及药物治疗,第2组采用前后对照法观察药物对吗啡依赖戒断症状的影响。
1.6 用药方案设计
    给药途径：正寿王1号为混悬粉末,采取灌胃（ig）方式给药；但在跳跃实验中,因纳洛酮发挥疗效时间有限,为了不错过引发戒断症状的时机,我们对正寿王1号采取ip方式给药。
正寿王2号为液体,为更快发挥药效采用ip方式给药。但在观察扭体实验中,由于刺激液用ip方式,为避免与正寿王互相影响,后者采用ig方式给药。
1.7统计方法： χ2检验。

2 结果
2.1小鼠实验
2.1.1小鼠跳跃试验 
    用纳洛酮前各鼠无跳跃现象,故不设第2组。第3组与第4组互为对照, 第3组ip等容生理盐水作为催促后跳下鼠次的标准,第4组ip正寿王。结果正寿王有明显的抗跳跃效果,见表1。
2.1.2小鼠其它戒断症状
     第1组安静、活动少、聚堆、大小便不多、无唾液分泌增多（仰头吞咽动作）现象。而催促后的第3组则除了向台下跳跃外,尚有不安、跑动、不聚堆、大小便增多、唾液分泌增多现象。给正寿王（无论1、2号及高、低剂量）后能明显减轻以上戒断症状。
2.2大鼠实验
2.2.1大鼠摇头试验 
    本实验只在第3组与第4组之间进行对比实验。正寿王用药的影响进行前后对照,故不另设第2组,见表2。 
    第1组也有摇头现象,但在用药前第3、4组比第1组摇头次数明显多,而第3、4组间无显著性差异。用药后,正寿王1、2号都有明显的抗摇头效果（P<0.01）。
2.2.2大鼠攻击试验 
    本实验吗啡依赖后未见大鼠有自发攻击行为,故设计了ip刺激液诱发攻击行为。第2、3组的大鼠每只每次ip 0.6 ml后,皆出现明显的扭体甚至翻滚现象。第1组无攻击现象；第3组有严重的攻击现象,有的大鼠嘴部咬破出血，ig等容盐水后,攻击行为仍然存在。第4组分4批（每日1批）观察正寿王1、2号高、低剂量对抗攻击效果。给正寿王前先ip刺激液,观察15 min内大鼠反应,作为用药前对照，ig正寿王40 min后再观察15 min内各指标变化情况。第3组用药前相当于第2组,故不另设第2组,见表3。
2.2.3大鼠体重减少试验 
    从表4可见第2组及第4组与第1组相比体重增长缓慢。
    为观察大鼠停用吗啡后的体重变化情况,于d 24开始,吗啡组又连续sc 吗啡3 d（每次60 mg·kg－1，每日2次),大鼠各种情况好转,体重上升(但有5只大鼠在复用吗啡过程中死亡),停用吗啡后体重急剧下降,24 h后下降基本停止,个别鼠体重略有上升；第4组是应用正寿王组,体重变化情况与第2组无显著性差异,见表5。
2.3犬实验
    6只犬,其中4只按计划方案形成吗啡依赖模型,2只sc等容生理盐水作为对照。吗啡给药中途1只犬死亡。另3只连用吗啡14 d后停药72 h观察戒断症状。
    与盐水对照犬相比,吗啡依赖犬有以下各种症状：最明显的是流涎,呈长丝状外流；行为方面的改变主要是不安、躁动、呻吟、易激惹,以木棒触碰则咬木棒；犬的进食量明显减少,犬的情感淡漠；此外还有散瞳、呕吐样动作及不明显的肌束震颤。
    停用吗啡3 d后开始应用正寿王,第1只犬ip正寿王2号,午前0.4 g· kg－1，午后又ip 1.2 g· kg－1；第2只犬午前ip正寿王2号2.5 g· kg－1,午后ig正寿王1号0.75 g·kg－1;第3只犬午前ip正寿王2号1.2 g·kg－1,午后ig正寿王1号0.5 g·kg－1; 第3只犬翌日午前ip正寿王2号1.2 g·kg－1,午后ig正寿王1号0.6 g·kg－1。各犬各次用药后戒断症状都有所改善,主要表现为流涎减少,安静驯服,不易激怒,用木棒碰触无反应,肌束震颤消失等。而对散瞳影响不大。
    用正寿王的吗啡组犬体重增长较盐水组明显缓慢，有的犬体重甚至急剧下降。正寿王2号高剂量（2.5 g·kg－1）给犬ip后数分钟内发生一次呕吐,其余各犬各次用药后无特殊反应。

3 讨论
3.1连续使用吗啡后小鼠出现竖尾现象；大鼠则出现攻击行为、体重减轻；狗则出现流涎、行为改变、散瞳、呕吐及肌束震颤等,以上都说明吗啡依赖的模型制作成功。
3.2单纯吗啡组以纳洛酮催促诱发的小鼠跳下率与文献无差别；另外,大鼠用刺激液后引起大鼠的对阵及攻击现象等都说明催促诱发成功。
3.3跳跃实验表明正寿王小剂量即可获得较好的效果,增加剂量作用无变化。正寿王2号有非常显著的抗跳跃作用（P<0.001）；正寿王1号也有此作用,但效果不如正寿王2号（P<0.01）。
3.4在大鼠攻击实验中,生理盐水组无攻击现象；吗啡依赖的第3组有明显攻击现象,此现象不因ig生理盐水而消失,但不论正寿王1、2号及高、低剂量皆有明显的抗攻击行为效果。因为各指标难以准确量化,未进行统计分析处理。
3.5整个大鼠依赖形成过程中动物体重变化表明吗啡组与生理盐水组相比,体重增长缓慢；第4组因反复使用正寿王,故体重较第3组低。这是因为无论ip或ig正寿王,都会影响大鼠的食欲,减少进食,故体重下降。
3.6在小鼠、大鼠及犬3种动物上实验观察了正寿王对7种指标（小鼠2种：跳跃、综合；大鼠3种：摇头、攻击、体重减少；犬2种：综合、体重减少）的影响,说明正寿王两制剂对小鼠跳跃及综合指标有明显对抗效果；对大鼠的摇头和攻击有明显抑制效果；对犬的综合戒断症状有较好的控制作用。这说明正寿王主要作用是：控制不安、躁动和过度兴奋症状（小鼠跳跃,大鼠攻击）；改善植物神经功能紊乱（综合指标中唾液分泌及大小便情况）；改善失常行为（攻击、躁狂、乱跑及犬的情感等）；减轻大鼠摇头等症。
3.7正寿王的作用机制
    许多中枢神经抑制药都能控制诸如小鼠跳跃现象[1] 等。正寿王除具有控制小鼠的跳跃作用、 大鼠的攻击行为外,还能产生类似地西泮的作用,所以我们认为正寿王具有中枢抑制作用,属于非特异的控制吗啡戒断症状的药物,亦即是对症治疗药。

4 参考文献
1徐叔云,卞如濂, 陈 修, 主编. 药理实验方法学.第2版.北京: 人民卫生出版社, 1991. 218－220; 707－711
2中华人民共和国卫生部药政局. 新药（西药）临床前研究指导原则汇编（药学 药理学 毒理学）.北京: 人民卫生出版社, 
1993. 219－221
3中华人民共和国卫生部.新药申批办法.北京: 人民卫生出版社， 1985. 102－112
4蔡志基, 李 密, 王 骏, 等. 氨酚待因片的药效学研究.中国临床药理学杂志, 1986, 2: 210－216
5 Way EL, Lon HH, Shen FH. Simultaneous quantitative assessment of morphine tolerance and physical dependence . J 
Pharmacol Exp Ther, 1969, 167: 1－8
6 Lal H, ed. Neuropsychopharmacology. Oxford: Pergamon press, 1978.289－298
7 Ehrenpreis S, ed. Methods in narcotics research. New York :Marcel Dekker, 1975.156－164

正寿王系列药物对抗吗啡依赖动物戒断症状
的实验观察

刘 强1 赫梅生1 詹丽芬1 张玉芝1 冯 昱2 赵迎庆3

1（中国医科大学基础医学院药理教研室, 沈阳, 110001）
2（中国医科大学第一临床医学院神经内科, 沈阳, 110001）
3（沈阳市第五人民医院消化内科, 沈阳, 110023）