摘要 目的: 观察褪黑素（melatonin,MT）对吗啡戒断小鼠前列腺及睾丸的组织学影响。方法： 设立对照组（A）和实验组（B、C、D）， 实验组分别皮下注射定量吗啡， 建立吗啡依赖模型， A组皮下注射等量生理盐水， B组继续注射吗啡， C组自然戒断， D组自然戒断后给MT。实验后将前列腺及睾丸作HE染色， 光镜观察， 并进行图象分析。 结果： 吗啡依赖组小鼠前列腺和睾丸组织有不同程度萎缩；吗啡戒断组小鼠前列腺组织有明显增生，睾丸组织有轻度增生； 吗啡自然戒断后给MT组小鼠前列腺和睾丸组织基本正常。结论： MT可抑制吗啡戒断小鼠前列腺和睾丸组织的增生。
    关键词 褪黑素； 吗啡戒断； 前列腺； 睾丸
    文献报道，褪黑素（melatonin,MT）是松果腺分泌的一种吲哚类激素，药理剂量的MT具有镇静、镇痛、催眠、转移时差、神经保护和增强身体免疫力等多种功能[1]， MT 还有抗焦虑抗惊厥作用[2]。动物实验表明大鼠吗啡戒断后可引起前列腺及睾丸组织的增生[3]，而关于小鼠吗啡戒断后前列腺及睾丸的组织学变化及MT对其组织学影响，国内外报道较少，本实验设立对照组（A组），吗啡成瘾组（B组），吗啡戒断组（C组）及吗啡戒断后给MT组（D组）。旨在观察MT对吗啡戒断小鼠前列腺及睾丸的组织学影响。

1 材料与方法
1.1 实验动物
    选用成年昆明小鼠，♂，体重18－22 g ,北京大学医学部实验动物科学部提供。
1.2 实验药品
    盐酸吗啡，青海制药厂出品，批号：940702。褪黑素，北京生鸿技术有限责任公司出品。
1.3 方法 
1.3.1 建立动物模型 将72只小鼠随机分为对照组（18只）和实验组（54只），实验组分B、 C、 D 3 组（每组18只）， 分别由背部皮下注射(sc)定量吗啡 5 d，70 mg·kg－1,每日注射两次（8:00、16:00）。对照组sc等量的生理盐水。B组于实验的d6继续注射原剂量的吗啡至实验结束，而C组在d6停药并sc等量生理盐水, D组又分成3组（第1组、第2组、第3组，每组6只），在实验d6停药并开始用MT灌胃（ig）50 mg·kg－1,每日一次。第1组、第2组、第3组分别连续ig 5 d、 25 d、 45 d。
1.3.2 取材和结果处理 分别于实验的d10、d30、d50分三批用颈椎脱臼法处死小鼠，立即打开腹腔，摘取前列腺和睾丸，Buine氏液固定，常规石腊包埋切片（6 μm）,HE染色后，光镜观察，并对第三批小鼠切片用Leica Q 500 MC进行图像分析，每组随机取6张切片，每张切片随机选择5个视野，测各成分的相对含量，结果用t检验进行统计学处理。

2 结果
2.1 正常小鼠前列腺及睾丸组织结构
    在HE染色的标本中，正常成年小鼠前列腺腺泡上皮多为单层立方上皮或假复层柱状上皮，腺泡腔内充满分泌物，腺上皮细胞向胞腔伸入形成皱襞（见图1）。小鼠睾丸曲精小管生精上皮均正常。从基底部到腔面可见精原细胞、精母细胞、精子细胞。腔内有大量成熟精子（见图2）。
2.2 吗啡依赖小鼠前列腺及睾丸组织学变化
    吗啡依赖小鼠的前列腺细胞出现萎缩，腺上皮变薄，少数腺细胞变性水肿，腺泡腔中分泌物减少，且萎缩程度和成瘾时间呈正相关，吗啡成瘾50 d的小鼠，腺上皮进一步变薄,腺细胞层数减少，腺泡腔分泌物减少甚至消失，乳头减少（见图3）。睾丸组织生精上皮层数减少，曲精小管变细，曲精小管腔内精子减少，并发现脱落的生精细胞及较多的异常精子（见图4）。
2.3自然戒断组小鼠前列腺及睾丸组织的变化
    组织切片可见腺上皮变高，腺泡腔充盈，间质细胞增生，腺体数量增多，呈囊性扩张，腺上皮细胞层数增多，乳头增生（见图5,6）。
2.4吗啡戒断后给MT 组小鼠前列腺及睾丸的变化 第1组和第2组小鼠前列腺及睾丸组织结构基本正常，第3组小鼠前列腺组织少数上皮细胞轻度萎缩，腺泡上皮表面皱襞消失，腺腔光滑。大部分腺上皮多为单层立方上皮。睾丸组织曲精小管变细（见图7,8）。
2.5 图象分析结果
见表1和表2。

3 讨论
    前列腺良性增生症是当前发病率较高的泌尿生殖系统疾病，据统计在45 a以上的男性中发病率可达45％以上，因此在临床上寻找治疗良性前列腺增生的新药非常必要。据文献报道，前列腺的结构功能主要受下丘脑－腺垂体－性腺轴的影响，其分泌活动主要受睾丸酮（T）和催乳素（PRH）的调节，而睾丸酮的分泌又受黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）的调节，吗啡可通过抑制LH的分泌使睾丸间质细胞分泌睾酮下降，导致前列腺组织的萎缩。吗啡戒断后，由于对性腺轴抑制因素解除，反射性引起性腺轴功能活动增强，从而引起T分泌增多，导致前列腺组织的增生[3]。实验中出现的小鼠吗啡成瘾后睾丸组织的变化是由于慢性中毒所致下丘脑－垂体－性腺轴功能紊乱，睾丸间质细胞分泌的睾酮减少,睾丸生精管局部的睾酮浓度下降，而引起生精细胞的分裂、繁殖及精子发育、成熟过程异常。
    MT是由松果腺分泌的一种吲哚类激素，有广泛的生理和药理活性，能抑制下丘脑的促性腺激素和垂体前叶的促性腺激素,参与动物和人类的性成熟和生殖行为和青春期发育。随着个体发育及成熟，松果腺的分泌活动逐步减弱[4] 。此外MT还具有镇痛[5]和改善睡眠的作用。我们近期有实验证明， MT可抑制小鼠吗啡戒断症状，同时使血中单胺类递质减少 [1]。本实验发现吗啡自然戒断小鼠前列腺有明显的增生，给吗啡依赖小鼠ig一定剂量MT，可使吗啡戒断小鼠前列腺组织接近正常，这种抑制作用可能是通过MT抑制垂体促性腺激素分泌的结果，也可能直接作用于前列腺引起前列腺的萎缩，因为在前列腺上皮细胞上有明确的MT受体[6]，因此，当MT和受体结合后直接抑制睾酮依赖的前列腺的生长。MT抑制下丘脑的促性腺激素和垂体前叶的促性腺激素的作用，使FSH和LH分泌减少，促使睾酮分泌减少，从而使小鼠的前列腺组织接近正常。
    本实验证明MT特异性抑制前列腺增生的作用，
这些结果为临床上前列腺增生的辅助治疗以及MT
在临床上新的应用提供了有价值的参考。

4 参考文献
1 邱 芸， 康立生， 邱学才.褪黑激素对小鼠吗啡戒断反应及血清单胺类递质的抑制作用.中华医学杂志， 1998， 9：704－
706.
2 Yamamoto H,Tang HW. Preventive effect of melatonin against cyanide－induced seizures and lipid peroxidation in mice, 
Neurosci Lett, 1996 , 207： 89－92.
3 刘 健， 李艳萍.5—HT1A受体激动剂乌拉地尔对吗啡依赖大鼠前列腺组织的病理学影响. 中国药物依赖性杂志， 2000, 
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4 Prendergast BJ, Kelly KK, Zucker I, et al. Enhanced reproductive response to melatonin in junvenile Siberian ham_
sters. Am J Physiol, 1996, 271:1041－1046.
5 周裔春， 邱学才.褪黑激素对大鼠基础痛阈的影响.中国药物依赖性杂志, 2000, 9:104－105.
6 Gilad E, Pick E, Matzkin H, et al. Melatonin receptors in benign prostate epithelial cells: evidence for the involve_
ment of cholera and per tussis toxins－sensitive G proteins in their signal transduction pathways. Prostate, 1998, 35: 
27－34.


EFFECT OF MELATONIN ON HISTOLOGICAL CHANGES OF PROSTATE 
AND TESTIS IN MORPHINE WITHDRAWAL MICE

TIAN Sumin1, LI Yinsheng1, TANG Yan2, LI Feng2, QIU Xuecai2
1(Xinxiang, Medical College, Xinxiang, 453003)
2(Department of Physiology,Peking University Health Science Center,Beijing,100083)

ABSTRACT Objective: To observe the histological effect of melatonin on prostate and testis in morphine withdrawal mice. Method: A physical dependent model in mice was established by subcutaneous injection of morphine. The histological changes in prostate and testis were observed with microscope. Result: The prostate and testis in morphine dependent mice were atrophied. A multiplication of prostate could be observed in natural morphine withdrawal mice and multiplication of prostate and testis could be inhibited by melatonin. Conclusion: The multiplication of prostate in morphine withdrawal mice could be inhibited by melatonin .
KEY WORDS melatonin; morphine withdrawal; prostate; testis 收稿日期：2000－04－27
修回日期:2000－05－31

中国药物依赖性杂志

2001年 第10卷 第1期