摘要   目的：观察四氢原小檗碱同类物(THPBs)对吗啡依赖小鼠和大鼠戒断症状的影响。方法：以连续递增剂量方式sc盐酸吗啡，建立吗啡依赖小鼠和大鼠模型，ip THPBs 20 min后，用环丙羟丙吗啡(小鼠5 mg·kg^－1，大鼠2 mg·kg^－1,ip)催瘾。结果：小鼠分别ip l－四氢巴马汀（l－THP，15,30,60 mg·kg^－1 )、l－千金藤啶碱（l－SPD，15,30,60 mg·kg^－1 )和 dl－四氢巴马汀（dl－THP，15,30,60 mg·kg^－1 )可显著抑制其跳台反应，降低跳台次数，减少体重下降。大鼠分别ip l－THP(10,20, 40 mg·kg^－1 )和dl－THP(10, 20, 40 mg·kg^－1 )能够抑制1 h体重下降，大大改善戒断时的行为表现，减轻腹泻和流涎，症状评分随剂量增加而下降。l－SPD抑制大鼠戒断症状作用虽无剂量依赖关系，但10 mg·kg^－1 却可减轻大鼠24 h体重下降。结论： THPBs可缓解吗啡依赖小鼠和大鼠戒断症状，可能具有临床应用价值。
    关键词   四氢原小檗碱同类物； 吗啡； 依赖； 戒断综合征

      滥用阿片类麻醉药品可产生依赖性，一旦停药即可出现痛苦异常的戒断症状。因此抑制或缓解戒断症状是戒毒治疗的重要途径之一。据报道[1] 激动多巴胺(dopamine,DA)受体可加剧阿片的戒断反应，而阻断DA受体则可缓解。四氢原小檗碱同类物l－四氢巴马汀，dl－四氢巴马汀和l－千金藤啶碱是从云南防已科植物河谷地不容中提取的生物碱，具有镇痛、镇静、安定等广泛的药理活性，并证明它们均具有阻断多巴胺受体的作用[2]。然而它们是否能够抑制吗啡依赖动物的戒断症状尚未见报道。为此，本文以吗啡依赖小鼠和大鼠为模型，用阿片受体特异性阻断剂环丙羟丙吗啡作催瘾剂[3]，观察了四氢原小檗碱同类物对催促戒断症状的影响。

1  材料和方法
1.1 材料
1.1.1 动物   ICR小鼠，♂，体重18－20 g。SD大鼠，体重170－220 g，♀、♂兼用。由南京铁道医学院实验动物中心提供。
1.1.2  药品  l－四氢巴马汀(l－tetrahydropalmatine, l－THP)湛江制药厂提供；dl－四氢巴马汀(dl－tetrahydropalmatine, dl－THP)南宁第二制药厂提供；l－千金藤啶碱(l－stepholidine,l－SPD)南宁第二制药厂提供；盐酸吗啡(morphine hydrochloride，批号：961102)注射液沈阳第一制药厂提供；盐酸环丙羟丙吗啡(diprenorphine hydrochloride, M5050 ，批号：930615)北京医科大学中国药物依赖性研究所提供。
1.2  方法
1.2.1  吗啡依赖小鼠模型的建立及观察指标  参照文献模型[4] 。小鼠随机分组，sc盐酸吗啡，对照组sc生理盐水，每日2次(上午8:00，下午16:30)，连续给药4 d，剂量分别为25, 50, 100, 150 mg·kg^－1。d5晨注射吗啡75 mg·kg^－1，4 h后ip M5050  5 mg·kg^－1，立即将小鼠放在一个直径30 cm，高35 cm的圆台上，观察30 min内小鼠跳台反应，包括跳台发生率和跳台次数，1 h后称重，观察催瘾前和催瘾后1 h体重变化。
1.2.2  吗啡依赖大鼠模型的建立及观察指标  参照文献模型[5]。象小鼠一样，每日2次sc盐酸吗啡，对照组sc生理盐水，dl剂量为20 mg·kg^－1，以后每天递增20 mg·kg^－1，共给药5 d，最后1 d达100 mg·kg^－1。d6晨注射吗啡50 mg·kg^－1， 3 h后ip M5050  2 mg·kg^－1，观察1 h内戒断症状，包括行为表现，如高度激惹、咬牙、跳跃、摇体、扭体、钻洞、眼睑下垂、呼吸急促、异常姿势以及植物神经系统症状、腹泻和流涎。于催瘾前和催瘾后1 h和24 h观察体重变化。观察方法及评分参考文献[6] 和北京医科大学中国药物依赖性研究所的方法略加改进。
1.2.3 药物试验   于M5050 催瘾前20 min分别给小鼠和大鼠ip各药物，对照组ip生理盐水(NS)，同上法观察各种药物对大、小鼠戒断症状和体重的影响。
1.2.4 数据处理   数据以均数±标准差(x ±s)表示。跳台发生率用四格表卡方检验，其它用t检验进行统计学处理。

2  结果
2.1 对吗啡依赖小鼠戒断症状的影响
      小鼠ip M5050  5 mg·kg^－1, 30 min内跳台发生率达100％，平均每只跳台6.3±s 5.9次，体重减轻1.63 g±s 0.37 g，各项指标均与模型对照组有显著差异(P<0.01)。表明吗啡依赖小鼠模型是可靠的。
      给吗啡依赖小鼠ip l－THP 15, 30, 60 mg·kg^－1，30 min内跳台发生率、平均跳台次数以及体重减轻均较对照组显著减少(图1)。跳台发生率与剂量间呈负相关关系(r=－0.9990, P<0.05)，各剂量间差异有显著性(P<0.05或0.01)。60 mg·kg^－1可完全抑制各种戒断症状，并逆转体重下降，此时动物安静，可活动。
      l－SPD 15, 30, 60 mg·kg^－1 ,ip,结果与l－THP相似，对戒断症状有显著抑制作用(图1)。跳台发生率亦呈剂量依赖关系(r=0.9999, P< 0.01)，大、小剂量间差异有显著性(P<0.05)。
      dl－THP 15, 30, 60 mg·kg^－1 ,ip，可抑制跳台反应和体重减轻，减少平均跳台次数。60 mg·kg－1 作用最强，30 mg·kg^－1作用似不及15 mg·kg^－1，但两者差异无显著性(图1)。
2.2  对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响
      大鼠ip M5050  2 mg·kg^－1，可诱发产生11种戒断症状及体重下降，与模型对照组差异有显著性(P<0.05或0.01)。
      给吗啡依赖大鼠分别ip l－THP 10, 20, 40 mg·kg^－1 和dl－THP 10, 20, 40 mg·kg^－1，戒断症状记分随剂量增大而减少(表1)，dl－THP各剂量间差异有显著性(P<0.05或0.01)，l－THP大剂量与中、小剂量间差异有显著性(P<0.01)。40 mg·kg－1时可抑制除眼睑下垂以外的其它所有行为症状，故两药对行为表现的抑制作用较强，而此时动物并未昏睡。对植物神经系统症状如腹泻和流涎，可使其严重程度减轻，尤以40 mg·kg^－1作用最强。两药对体重影响结果见表1。从表中看出，l－THP可明显减轻1 h时大鼠体重下降，大剂量与中、小剂量间差异有显著性(P<0.05)。而dl－THP仅在40 mg·kg^－1时呈现显著抑制。两药24 h的体重变化与对照组差异无显著性。   
      大鼠ip l－SPD 2.5, 10, 20, 40 mg·kg^－1，戒断症状记分虽较对照组显著下降，但无剂量依赖关系(表1)。在10－40 mg·kg^－1，行为表现记分反而愈来愈高。对1 h体重下降的抑制作用仅在40 mg·kg－1时呈现显著性。与l－和dl－THP不同的是，l－SPD 10 mg·kg^－1可以抑制24 h的体重下降。在所试剂量中，以10 mg·kg^－1 l－SPD对戒断症状的抑制作用最强。

3  讨论
      四氢原小檗碱同类物对吗啡戒断症状的影响尚未见报道。本文结果表明l－THP、dl－THP和l－SPD均可不同程度地缓解吗啡戒断症状，其中以l－THP作用最好。dl－THP对大鼠的作用与l－THP相似，但对小鼠的作用不及后者。l－THP能够显著抑制小鼠跳台反应，大大改善大鼠行为表现，减轻腹泻和流涎症状，抑制大、小鼠体重下降。在两种动物模型上其作用均随剂量增加而增强。大剂量时抑制作用最好，而这时动物并未昏睡，能活动。提示并非是中枢神经系统广泛深度抑制所致。由于l－THP具有很好的镇痛、镇静和安定作用，副作用小，且无成瘾性，因此可能是一种很有临床应用价值的戒毒药物。我们曾将它与其它药物一起合用治疗海洛因依赖病人，取得较为理想的效果(未发表的观察资料)。
      据报道[7] ,吗啡依赖时中枢DA受体亲和力增加，DA释放增多。l－THP、dl－THP和l－SPD通过阻断DA受体，从而对抗DA能神经功能增强的作用，所以可以缓解戒断症状。此外，长期使用阿片类物质可使内源性β－内啡肽释放减少[8]，四氢原小檗碱同类物能够促进正常大鼠脑内脑啡肽和β－内啡肽的释放[9]，这可能是该类药物抑制戒断症状的一个很重要的原因。
      值得注意的是，l－SPD对大鼠戒断症状的抑制作用不象在小鼠有剂量依赖关系，但却可以减轻大鼠24 h体重下降，原因不清。至于对行为表现的抑制在10 mg·kg－1以上时反而减弱，可能与l－SPD既阻断D2 受体又能激动D1 受体有关[10]。这些有待进一步研究探讨。 

4  参考文献
 1  张开镐，龚  苕. 阿片药物戒断的生化机制. 中国药物依赖性通报, 1993，2:230－233.
 2  金国章，汪晓立，施卫星.  新化学类型多巴胺受体阻滞剂四氢原小檗碱同类物. 中国科学B辑, 1985,(10):925.
 3  Paterson SJ, Robson LE, Kosterlitz HW. Classification of opioid receptors. Br Med Bull，1983,39:31－36.
 4  刘  屏，陈世铭，陈慧英,等. 钙拮抗剂、抗胆碱药对吗啡依赖小鼠催促戒断症状的治疗作用. 中国药物依赖性通报,1996,5:16－18.
 5  王丹心，柳用绍，秦伯益. 二氢埃托啡对吗啡依赖大鼠和猴的实验治疗. 中国药理学与毒理学杂志，1992,6:36－40.
 6  Ling GSF, Tappe NS, Inturrisi CE. Methadone induced physical dependence in the rat. Life Sci，1983,34;683－690.
 7  Schrater PR, Russo AC, Stanton TL, et al. Changes in striatal dopamine metabolism during the development of morphine physical dependence in rats:observations using in vivo microdialysis. Life Sci， 1993,52:1535－1545.
 8  杨  良，李  红，徐仕文. 海洛因依赖者血浆β－内啡肽测定. 中国药物依赖性通报，1993,2:85.
 9  王黎明，刘  健，傅  雨,等.四氢原小檗碱同类物对中枢内源性阿片肽含量的影响. 中国药理学会通讯，1996,13:11－12.
10 金国章. 左旋四氢巴马汀和它的第二代新药左旋千金藤啶碱的药理研究进展. 药学学报，1987,22:472－480.

EXPERIMENTAL STUDY OF TETRAHYDROPROTOBERBERINES

 INHIBITING MORPHINE WITHDRAWAL SYNDROMES

Ge Xiaoqun1, Zhang Hongquan1, Zhou Huazhu2,Xu Zhengxin1, Bian Chunfu3

 1(Department of Pharmacology, Medical College, Yangzhou University, Yangzhou,225002)
2(Department of Physiology, Medical College, Yangzhou University, Yangzhou, 225002)
3(Department of Pharmacology, Xuzhou Medical College, Xuzhou, 221002)

ABSTRACT   Objective:To study the effects of tetrahydroprotoberberines(THPBs) on the withdrawal syndromes in morphine－dependent mice and rats. Method: Mice and rats were administered (sc) with morphine hydrochloride in increasing doses.Then the withdrawal syndromes precipitated by diprenorphine (5 mg·kg－1 in mice, 2 mg·kg－1 in rats) were observed 20 minutes after THPBs were given (ip). Result: l－THP, dl－THP and  l－SPD,at dose 15, 30, 60 mg·kg－1 (ip), respectively, were able to inhibit mice incidence and freguency of jumping and body weight loss significantly. Similarly, behavioral withdrawal syndromes of rats, i.e.enraging, teeth chattering, wet dog shakes,jumping etc, were greatly depressed; diarrhea, salivation and weight loss(1h)were also reduced by l－THP and dl－THP(10, 20, 40 mg·kg－1,ip). Abstinence syndrome scores were decreased as  doses were increased.  Furthermore,l－SPD 10 mg·kg－1 could  reduce rat  weight loss at 24 hour,  although its effects inhibiting withdrawal syndromes were not dose－related. Conclusion:THPBs could inhibit abstinence syndroms in morphine－dependent mice and rats,which suggested that it may be useful in  clinical detoxification.
KEY WORDS tetrahydroprotoberberines; morphine; dependence; withdrawal syndrome

修回日期：1998－11－06