美施康定(Mscontin)为硫酸吗啡控释片,是强效中枢性镇静药,主要用于晚期癌症患者的第三阶梯止痛。由于长期应用本品可产生耐受性、身体依赖性和成瘾性［1］，故而我们建立了HPLC法测定其血药浓度的方法，以便配合临床指导合理应用，同时由于该类药物属于麻醉品管理范围，此方法也可作为对社会上滥用该类药物现象的一种监测方法［2］。

　　1 仪器与试药

　　日本岛津LC-6A高效液相色谱仪，包括：LC-6A恒流泵、CTO-6A柱恒温箱、SPD-6AV紫外检测器、SCL-6B色谱系统控制器、C-R4A色谱数据处理机。

　　甲醇(色谱纯)，重蒸馏水，硫酸吗啡标准品及内标物安定(中国药品生物制品检定所)，美施康定片(10mg/片，北京萌蒂医药有限公司)，其余试剂均为分析纯。

　　硫酸吗啡标准溶液：精密称取硫酸吗啡标准品20mg置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解后定容。以此液稀释成一系列浓度的溶液。

　　内标溶液：精密称取内标物安定20mg置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解后定容。

　　2 色谱条件

　　色谱柱：YWG-C18 10μm 4.6mm×250mm(天津三维色谱仪器配件厂)；流动相：甲醇—pH5.3的0.02mol/L磷酸盐缓冲液(40∶60);流速：1.0mL/min；检测波长：254nm；灵敏度：0.005AUFS；柱温：45℃；进样量：20μL。

　　3 方法与结果

　　3.1　线性关系　取7份空白血清1.0mL加入一系列浓度的硫酸吗啡标准溶液，使血清中硫酸吗啡浓度分别为0.25、0.5、1.0、2.0、5.0、8.0、10.0μg/mL，再分别加入内标溶液25μL，在旋涡混合器上充分混匀后，通过已处理好的SPE-C18小柱，再用蒸馏水2.0mL冲洗小柱，弃去水溶液，除去小柱上残留的水液，再用4mL甲醇冲洗小柱2次，接收甲醇洗脱液，在60℃恒温水浴上用氮气流吹干，残留物用100μL流动相溶解，并取20μL注入色谱柱。以硫酸吗啡与内标物安定的峰面积比值为纵坐标，以硫酸吗啡浓度为横坐标，计算线性回归方程：Y=510.65X+11465.41　r=0.9994

　　结果表明硫酸吗啡血药浓度在0.25～10.0μg/mL范围内线性关系良好。硫酸吗啡的保留时间为12.03min,安定保留时间为8.56min。

　　3.2　提取回收率试验　取空白血清1.0mL若干份，分别加入硫酸吗啡标准溶液，使血清中药物含量分别为0.5、2.0、5.0μg/mL，再分别加入内标溶液25μL混匀后，按“线性关系”项下，提取测定并计算回收率。3种浓度的回收率分别为　91.56%、90.21%、94.45%，RSD分别为0.97%、0.93%、0.89%，n=3　。

　　3.3　方法精密度　取空白血清1.0mL若干份，分别加入硫酸吗啡标准溶液，使血清中药物呈不同浓度，按前述方法分别于日内和日间提取分析，日内回收率92.67％(n=3)，RSD为0.93％，日间回收率91.84％(n=3)，RSD为1.02％。

　　3.4　方法应用　临床监测癌症患者2例，口服美施康定数日以减轻疼痛，12h服用20mg，有时30mg。常规取血按上述方法测定血药浓度为0.0058μg/mL和0.0074μg/mL。应用本方法监测3例瘾君子,均呈阳性，获得满意的结果。

　　4 讨论

　　4.1　本法采用SPE-G8小柱液－固提取法，较液－液提取操作简便，省时，节省了大量提取溶剂，且提取较安全。

　　4.2　美施康定为目前晚期癌症患者的第三阶梯止痛首选药。长期使用可产生耐受性和依赖性。临床根据患者疼痛程度、年龄及服用止痛药史决定用药剂量，个体间存在较大差异。因此我们建立此方法对临床该类药物的合理使用具有指导作用。同时在法医学检案中利用本法为更有效地禁止毒品滥用提供了一个可靠的监测手段。

　　参考文献：

　　1 姜佐宁等.药物成瘾的临床与治疗.第1版，北京：人民卫生出版社，1997.15

　　2 霍秀敏等.气相色谱法测定阿片类成瘾者尿中吗啡的含量.药物分析杂志，1993，13(6)：363