【摘要】目的　了解醇脱氢酶（ADH）和醛脱氢酶（ALDH）基因多态性与朝鲜族和鄂伦春族酒依赖发病的相互关系。方法　采用耳血聚合酶链反应及等位基因特异性寡核苷酸杂交方法，检测ADH和ALDH基因型在酒依赖患者(朝鲜族55例，鄂伦春族31例)与正常对照者(朝鲜族50名，鄂伦春族37名)人群中的分布频率。结果　在酒依赖组与正常对照组之间，朝鲜族仅ALDH2基因频率的分布差异有非常显著性(P<0.01)，而鄂伦春族的ADH3基因频率分布和ALDH2基因频率分布的差异有非常显著性和显著性(P<0.01，P<0.05)，两个民族的ADH2基因频率分布差异均无显著性。　结论 提示朝鲜族酒依赖的发生与ALDH2基因有关，鄂伦春族则为ALDH2和ADH3基因共同影响酒依赖的发生。

　　【关键词】酒精性饮料　行为 成瘾　醇脱氢酶　醛脱氢酶　多态现象（遗传学）

　　醇代谢酶分为醇脱氢酶(ADH)和醛脱氢酶(ALDH),与酒依赖的发生有密切的关系。我国不同民族的酒依赖发病率相差很大。我们在研究中国蒙古族、汉族的ADH和ALDH基因时发现，酒依赖组不仅ALDH2*2等位基因频率明显低于正常对照组，而且ADH2*2、ADH3*1等位基因频率亦低于对照组；同时发现，不同民族各自有其不同的特点［1］。在此基础上，我们又对朝鲜族和鄂伦春族中醇代谢酶基因多态性与酒依赖发生的相互关系进行了研究，报道于下。

    资料和方法

　　1. 资料：朝鲜族样本取自吉林省吉林市郊区阿拉底朝鲜族自治村，鄂伦春族样本取自黑龙江省黑河市郊区鄂伦春族自治村。每个民族分设酒依赖组与对照组，研究样本均为男性，年龄18～70岁，无其它精神和躯体疾病。为避免同种族通婚影响遗传背景，要求家系中3代以上无种族间通婚(由当地民族宗教事务委员会协助确认)、血缘纯正。酒依赖组中朝鲜族55例，鄂伦春族31例。对照组中朝鲜族50例，鄂伦春族37例。样本收集依据：酒依赖组由精神科专业医生对符合国际疾病分类第10版（ICD-10）诊断标准的酒依赖患者进行确诊。对照组除种族、性别、年龄、职业配对外，无饮酒个人史或仅有少量饮酒史，家族中无酒瘾及药瘾患者。

　　2. 方法：选用4对聚合酶链反应（PCR）引物对耳血干血痕样本进行DNA扩增，用8对［γ-32P］ATP标记的寡核苷酸探针对扩增产物进行杂交，最终确定ADH和ALDH的基因型。试验方法详见耳血干血痕直接PCR扩增及杂交方法［1］。采用SPSS统计软件对实验数据进行χ2检验分析。

    结果

　　各受试组的基因频率与Hardy-Weinberg平衡定律预期值相吻合(χ2检验,P>0.05)。研究结果显示，朝鲜族、鄂伦春族的酒依赖组与对照组之间ADH和ALDH基因频率的分布均有差异，同时两种民族之间ADH和ALDH基因频率又各自有其不同的特点。

　　一、酒依赖组与对照组ADH与ALDH基因频率的分布差异

　　在ALDH2基因位点，酒依赖组两个民族的ALDH2*2基因频率均比对照组降低(表1)，其中两组朝鲜族之间差异有非常显著性(χ2检验，P<0.01)，酒依赖组朝鲜族ALDH2*2基因频率降低至对照组的1/7；两组鄂伦春族之间虽有差异(Fisher检验,P<0.05)，但不如朝鲜族明显。在ADH2和ADH3基因位点，仅发现两组鄂伦春族ADH3基因频率之间的差异有非常显著性(χ2检验,P<0.01)，而ADH2基因频率差异无显著性。此外，两组间朝鲜族ADH2和ADH3基因频率的差异均无显著性。为除外ALDH2基因作用的影响，将对比控制在ALDH2*1等位基因纯合子个体范围后发现，这种仅在两组鄂伦春族ADH3基因频率之间的差异的非常显著性(χ2检验,P<0.01)仍存在(表2)。

　　二、对照组朝鲜族与鄂伦春族ADH与ALDH基因频率的分布差异

　　对照组朝鲜族与鄂伦春族在ADH2，ADH3和ALDH2基因位点上的差异不同。鄂伦春族的ADH2*1等位基因频率明显著高于朝鲜族，差异有非常显著性(χ2检验,P<0.01)；ADH3*1等位基因频率低于朝鲜族，差异有显著性(χ2检验,P<0.05)。在ALDH2基因位点，对照组鄂伦春族的ALDH2*1等位基因频率高达0.92，已接近酒依赖组朝鲜族的ALDH2*1等位基因频率（0.95)，而对照组朝鲜族的ALDH2*1等位基因频率仅为0.64。对照组两个民族间的差异有非常显著性(χ2检验,P<0.01)。

表1　ADH2、ADH3、ALDH2基因型频率与等位基因频率

组别	例数	基因型频率			等位基因频率
		*1/*1	*1/*2	*2/*2	*1	*2
ADH2
朝鲜族
对　照	50	0.06	0.46	0.48	0.29	0.71
酒依赖	55	0.16	0.31	0.53	0.32	0.68
鄂伦春族
对　照	37	0.32	0.59	0.08	0.62	0.38
酒依赖	31	0.42	0.48	0.10	0.66	0.34
			ADH3
朝鲜族
对　照	50	0.90	0.10	0.00	0.95	0.05
酒依赖	55	0.82	0.16	0.02	0.90	0.10
鄂伦春族
对　照	37	0.73	0.27	0.00	0.86	0.14△△
酒依赖	31	0.42	0.52	0.06	0.68	0.32
			ALDH2
朝鲜族
对　照	50	0.34	0.60	0.06	0.64	0.36△△
酒依赖	55	0.89	0.11	0.00	0.95	0.05
鄂伦春族
对　照	37	0.86	0.11	0.03	0.92	0.08△
酒依赖	31	1.00	0.00	0.00	1.00	0.00

经χ2检验，与酒依赖组比较，△P＜0.05；△△P＜0.01

表2　ALDH2*1纯合型个体中ADH2,ADH3基因型频率与等位基因频率

组别	例数	基因型频率			等位基因频率
		*1/*1	*1/*2	*2/*2	*1	*2
ADH2
朝鲜族
对　照	17	0.00	0.35	0.65	0.18	0.82
酒依赖	49	0.16	0.31	0.53	0.32	0.68
鄂伦春族
对　照	32	0.28	0.63	0.09	0.59	0.41
酒依赖	31	0.42	0.48	0.10	0.66	0.34
ADH3
朝鲜族
对　照	17	0.88	0.12	0.00	0.94	0.06
酒依赖	49	0.80	0.18	0.02	0.89	0.11
鄂伦春族
对　照	32	0.75	0.25	0.00	0.87	0.13△△
酒依赖	31	0.42	0.52	0.06	0.68	0.32

经χ2检验，与酒依赖组比较，△△P＜0.01

    讨论

　　分子遗传学研究证明，ADH和ALDH有若干亚型，其中ADH2、ADH3和ALDH2具有基因多态性［2］。ALDH基因编码的乙醛脱氢酶是影响血液中乙醛清除的主要因素，无活性的突变型ALDH2*2基因呈显性遗传，其合成的酶无活性、可使乙醛在血中蓄积。黄种人几乎30%～50%以上的个体ALDH2缺乏活性，而白种人的个体ALDH2缺乏活性仅不到1% 。这提示亚洲人酒依赖患病率低是由于无活性的ALDH2*2基因频率较高，使体内乙醛清除缓慢，诱导产生厌恶反应而出现被动保护作用。近年来的生化研究显示，乙醇脱氢酶变异导致的乙醛生成过快也可影响酒依赖发生，因此ADH基因编码的乙醇脱氢酶也是使血乙醛浓度增高的重要因素［3～8］。无活性的乙醛脱氢酶基因ALDH2*2和高活性的乙醇脱氢酶基因ADH2*2，ADH3*1，均可加速体内乙醛浓度升高，使体内乙醛蓄积而产生厌恶反应，对酗酒起保护作用［3～5］。本研究结果再次验证了上述理论，同时结合蒙古族、汉族的ADH和ALDH基因频率的研究结果［1］分析发现：

　　1. 朝鲜族与汉族ALDH2基因频率的分布基本相同。在朝鲜族和汉族中影响酒依赖发生的因素是ALDH2*2等位基因频率惊人的降低(χ2检验，P<0.01)。与朝鲜族相比，汉族酒依赖者ALDH2*2基因频率的降低更加明显，是对照者的1/11。同时在汉族和朝鲜族正常对照者之间ALDH2*2基因频率的差异亦有显著性(χ2检验，P<0.05)，而ADH2和ADH3等位基因频率无差异。

　　2. 蒙古族与朝鲜族、鄂伦春族及汉族均不同，我们曾在蒙古族的酒依赖组和对照组之间发现，ADH2基因的差异有非常显著性(χ2检验，P<0.01)。为除外ALDH2基因作用的影响，将对比控制在ALDH2*1等位基因纯合子个体范围后，显示这种ADH2差异的非常显著性(χ2检验，P<0.01)仍然存在。故可认为，对蒙古族影响酒依赖发生的因素是ADH2*2等位基因频率明显降低(χ2检验，P<0.01)，而ALDH2和ADH3等位基因频率的差异无显著性。

　　3. 鄂伦春族酒依赖组的ADH3*1等位基因频率较对照组明显降低(χ2检验，P<0.01)，但此现象未见于朝鲜族、蒙古族和汉族。提示在鄂伦春族酒依赖的发生中，ADH3*1等位基因频率的降低起重要作用。本结果还显示，鄂伦春族酒依赖组全部为具有活性的ALDH2*1纯合子个体，无ALDH2*2等位基因，与对照组ALDH2基因频率差异有显著性(χ2检验，P<0.05)。这说明ALDH2*2基因频率的降低在鄂伦春族酒依赖的发生中也起了一定的作用。

　　经Excerpt Medica: Psychiatry及Medline光盘检索系统的查新（1980年1月至1997年10月）证实，本系列研究为世界首次报道［9］了ADH和ALDH基因多态性与蒙古族和鄂伦春族酒依赖发生的相互关系，说明不同民族中影响酒依赖发生的保护因素不同：朝鲜族和汉族基本一致，主要是ALDH2基因起保护作用；蒙古族是ADH2基因发挥主要作用,而鄂伦春族则是ALDH2和ADH3基因共同发挥作用。从社会人口学发展的角度来看，蒙古族和鄂伦春族与汉族和朝鲜族的生活习惯和文化背景显著不同。蒙古族在历史上为游牧民族，鄂伦春族在建国前是生活在原始森林的游猎民族，这两个民族均以肉类为主食，以勇敢、强悍、善饮而著称。汉族和朝鲜族则以耕种为生，以谷类为主食。我们推测，这种与酒依赖发生有关的ADH和ALDH多态性等位基因频率在不同民族中的改变，可能与在人口进化中不同民族的社会、生活、文化等背景的不同有关［10，11］。

　　我们对我国东北地区朝鲜族、鄂伦春族、蒙古族、汉族酒依赖患者ADH和ALDH基因多态性的系列研究表明，ADH2，ADH3和ALDH2基因位点的等位基因差异是酒依赖发生的重要影响因素，但在不同民族中，对酒依赖的发生起保护作用的因素有所不同。我们的研究支持ALDH2*2以及ADH2*2、ADH3*1基因在保护机体避免发生酒依赖中起重要作用的假说。

    参考文献：

    1　沈渔，范建华，崔玉华，等. 中国蒙、汉族酒依赖与醇脱氢酶和醛脱氢酶基因多态性的相关研究. 中华精神科杂志，1997， 30:3-6.
　
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    6　Thomasson HR, Edenberg HJ,Crabb DW,et al. Alcohol and aldehyde dehydrogenase genotypes and alcoholism in Chinese men. Am J Hum Genet,1991,48:677-681.
　
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    8　Nakamura K, Iwahashi K, Matsuo Y, et al. Characteristics of Japanese alcoholics with the atypical aldehyde dehydrogenase 2*2. I. A comparison of the genotypes of ALDH2,ADH2, ADH3,and cytochrome P-4502E1 between alcoholics and nonalcoholics. Alcohol Clin Exp Res，1996, 20:52-55.
　
    9　Shen YC, Fan JH, Edenberg HJ, et al. Polymophism of ADH and ALDH genes among four ethnic groups in China and Effects upon the Risk for Alcoholism.Alcohol Clin Exp Res，1997,21:1272-1277.

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    11　Novoradovsky A, Tsai SL, Peterson GR, et al. Mitochondrial aldehyde dehydrogenase polymorphism in Aisan and American indian populations: detection of new ALDH2 alleles. Alcohol Clin Exp Res, 1995,19:1105-1110.