【摘要】 目的：研究糖皮质激素(地塞米松)对吗啡依赖大鼠催促戒断反应的抑制作用。方法：30只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、吗啡依赖组、地塞米松低剂量组、地塞米松中剂量组和地塞米松高剂量组，每组6只。依赖组和地塞米松各剂量组大鼠采用剂量递增方式给予腹腔内注射吗啡12天建立吗啡依赖大鼠模型，并分别于停用吗啡3 h、24 h和48 h后腹腔内注射灭菌注射用水和不同剂量地塞米松，30 min后用纳洛酮催促戒断症状，观察戒断症状30 min并进行评分。结果：地塞米松各剂量组大鼠的戒断症状评分显着减低，与吗啡依赖组相比P＜0.05～0.01，且随地塞米松剂量的增加，大鼠戒断评分的下降更为明显；即地塞米松各剂量组间比较P＜0.01；但地塞米松高剂量组大鼠的戒断症状评分仍显着高于生理盐水对照组（P＜0.01）。结论：地塞米松可明显抑制吗啡依赖大鼠催促戒断反应。这可能是由于预先给予外源性糖皮质激素后，能负反馈减弱下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴，减弱吗啡戒断反应时应激反应的强烈程度；另外，糖皮质激素可通过激活其受体调节神经元可塑性相关因子，减轻戒断症状。

　　【关键词】 糖皮质激素 吗啡 依赖 大鼠模型 戒断综合征 抑制效应

　　糖皮质激素(glucocorticoid)可能抑制戒断反应中的强烈应激反应1。通过离体小肠研究发现地塞米松能抑制其对吗啡产生依赖2。糖皮质激素的产生直接受到下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis,HPAA)调节，同时在不同水平上对其活性进行负反馈调节。此外，糖皮质激素通过神经系统中广泛分布的糖皮质激素受体，对神经系统的生长、发育及功能等方面产生一系列复杂的作用。据上所述，本实验采用不同剂量地塞米松观察其对整个戒断综合征的影响，为糖皮质激素应用于临床治疗阿片成瘾患者提供实验研究依据，并探讨其有关的机制。

　　1  资料与方法

　　1.1  吗啡依赖模型的建立与动物分组  取30只体重200±20 g、雄性SD大鼠(上海第二军医大学动物实验中心提供)，自由饮水和进食，随机分为五组：生理盐水对照组、吗啡依赖组、地塞米松低剂量组(10 mg/kg)、地塞米松中剂量组(20 mg/kg)和地塞米松高剂量组(40 mg/kg)，每组6只。吗啡依赖组和地塞米松各剂量组按照逐日递增剂量原则建立大鼠吗啡依赖模型，每天给予腹腔内注射吗啡3次，从第1日的5 mg/kg起，前6天每日递增15 mg/kg，自第7天起每日递增30 mg/kg，直到第12天的270 mg/kg3。按同样方式注射等容量生理盐水建立对照组。

　　1.2  实验药品  盐酸吗啡(morphine hydrochloride)，沈阳第一制药厂出品；盐酸纳洛酮(naloxone hydrochloride)，北京四环制药出品；地塞米松磷酸钠注射液，上海信谊药厂生产，批号007064。

　　1.3  实验动物给药方法  地塞米松各剂量组大鼠分别于停用吗啡3 h、24 h和48 h后，腹腔内注射地塞米松10 mg/kg(低剂量组)、20 mg/kg(中剂量组)和40 mg/kg(高剂量组)；30 min后再腹腔内注射纳洛酮4 mg/kg以催促戒断症状，观察戒断症状30 min并进行评分。吗啡依赖组和生理盐水组大鼠均用等容积灭菌注射用水替代地塞米松后，按同样方式处理。

　　1.4  戒断症状的观察与评分  戒断症状包括可数和不可数症状4。可数症状包括齿颤、吞咽、站立、跳跃、湿狗样抖擞、伸展、清理皮毛，记录每种症状的次数。不可数症状包括上睑下垂、流诞、体重丢失。观察戒断症状30 min期间按戒断症状评分标准评定可数戒断症状，但不包括不可数症状。

　　1.5  数据处理和统计学检验  各组的评分结果采用x±s表示。不同组之间的统计学比较采用方差分析，继以students' newman-keul检验，P＜0.05认为有统计学显着性差异。

　　2  结果

　　2.1  吗啡依赖大鼠的催促戒断反应  吗啡依赖组大鼠分别于停用吗啡3 h、24 h和48 h后用纳洛酮催促戒断反应，2～3min后出现明显行为异常，经定量评分后发现吗啡依赖组评分明显高于生理盐水对照组(P＜0.01)，也明显高于地塞米松各剂量组(P＜0.05)，见附表。

　　2.2  地塞米松对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响  如附表所示，地塞米松各剂量组停用吗啡3 h、24 h和48 h后用盐酸纳洛酮催促戒断反应，地塞米松低剂量组(10 mg/kg)、中剂量组(20 mg/kg)和高剂量组(40 mg/kg)大鼠的戒断评分均显着降低；与吗啡依赖组相比较，低剂量组P＜0.05，中剂量组P＜0.01，高剂量组P＜0.001，并且随地塞米松剂量的增加，大鼠戒断评分的下降更为明显，地塞米松剂量组间比较P＜0.01。然而，地塞米松高剂量组大鼠的戒断评分仍显着高于生理盐水组P＜0.01。

　　3  讨论

　　3.1  阿片成瘾大鼠的戒断症状多数表现为植物神经系统和运动神经系统功能亢进，其催促出现的戒断症状反应与应激反应具有相同的神经解剖机制。因此，当出现戒断症状时，同时伴有强烈的应激反应。有报道5长期使用阿片类药对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPAA)产生抑制作用。长期大量阿片类药进入体内，可竞争性取代内源性阿片受体配体β-内啡肽，从而使β-内啡肽与促肾上腺皮质激素(ACTH)的共同前提物质前阿黑皮素(POMG)的合成和分解减少，从而导致体内β-内啡肽及ACTH下降，引起肾上腺皮质功能减退，这样就使糖皮质激素的合成和分泌减少。因此，阿片成瘾患者的应激能力较正常人为低，对伤害刺激的适应能力及抗损害能力下降。

　　3.2  本研究发现，对阿片成瘾大鼠于催促戒断前预先给予不同剂量糖皮质激素(地塞米松)后，其戒断症状得到显着缓解，且随地塞米松剂量的增加戒断症状的缓解更为明显，表明地塞米松有助于提高机体对伤害刺激的适应性和耐受力，抵御和缓解戒断症状。另外，本研究发现，虽然高剂量(40 mg/kg)地塞米松对戒断症状的抑制作用最明显，但在研究后期有半数大鼠死亡，尸解表明多数大鼠出现肝肾出血及心力衰竭，这可能与地塞米松严重抑制HPAA后导致继发性肾上腺皮质功能严重减退有关，且糖皮质激素尚有影响凝血功能等严重副作用。因此，如果采用大剂量糖皮质激素阻断阿片戒断反应，可产生严重的毒副作用，不容忽视。

　　3.3  最近的研究表明，阿片成瘾是长期接触阿片类物质引起的大脑神经元分子和细胞生物学的适应性改变。对VTA区的DA神经元观察发现，慢性阿片用药可导致VTA区DA能神经元结构发生改变，即导致神经元中的神经纤维蛋白减少，胶质纤维酸性蛋白增多，从而使神经传导通路受损，在一定意义上讲，这种适应性变化是一种神经损害。基于这种变化，提出了神经元重塑理论，具体指长期滥用阿片类药，可引起神经元的慢性适应，在这种慢性适应性损害的基础上可表现神经系统电生理、神经元网络、神经免疫以及精神行为等一系列改变。有作者推测，吗啡处理后的神经细胞其胞体萎缩，在吗啡戒断反应时导致神经递质大量释放，对神经元造成损伤，胶质细胞衍生物的神经营养因子(GDNF)持续表达6，造成某些神经元的联系加强，这种形态结构和功能的变化可能影响胶质细胞的反应，胶质细胞把这种反应提交给淋巴细胞，从而使脑组织内特异性淋巴细胞克隆扩张，反过来又刺激周围神经元，使对吗啡渴求的心理状态保持很长的时间。因此，如果这一种假说成立，某些免疫抑制剂有希望在预防吗啡成瘾复吸中发挥作用。本实验选用糖皮质激素，企图通过激活糖皮质激素受体，调节神经元胶质细胞的代谢功能，包括调节神经元的可塑性。糖皮质激素可控制成年大鼠海马中不同的海马神经生长因子(NGF) mRNA的表达7。Aloe等对海马神经生长因子水平与糖皮质激素的关系进行研究，发现肾上腺切除术后发育的大鼠，其海马神经生长因子在海马中的水平显着降低8，这种作用在注射地塞米松后可被逆转。但在应激状态下产生的糖皮质激素则可引起脑源性生长因子(BDNF)在海马内的表达降低。Joels对皮质醇在海马锥体细胞中的电生理特性进行研究，发现用高剂量皮质醇对5-羟色胺(5-HT)受体的超级化有明显的抑制作用，主要与激活糖皮质激素受体有关9。因此，本研究发现地塞米松呈剂量依赖性抑制阿片成瘾大鼠的戒断症状，可能与糖皮质激素的上述作用密切相关，其具体机制尚需进一步深入研究。另外，本研究发现地塞米松高剂量组大鼠的戒断评分仍显着高于生理盐水组，提示阿片成瘾大鼠戒断反应的形成还有其它多种机制参与。总之，本研究应用地塞米松抑制阿片戒断反应取得了明显效果，为开发新的临床脱毒药物以及改进戒毒治疗方法提供有价值的参考依据。

　　参考文献：

　　1 郑春兰，赵永娜，张肇玖，等. 糖皮质激素对美沙酮抑制海洛因依赖大鼠戒断反应的影响. 中国药物依赖性杂志 1999，8：266～269.

　　2 Anna Capasso, Aldo Pinto, et al. Dexamethasone inhibition of acute opioid physical dependence in vitro is reverted by anti-lipocortin-Ⅰ and mimicked by anti-typeⅡ extracellular PLA2 antibodies. Life Sci 1997,61:127～134.

    3 纪家涛，王新华，由振东，等. 吗啡依赖大鼠模型的建立. 第二军医大学学报 1997，18：81～811.

　　4 Maldonado R, Negus S, Koob GF. Precipitation of morphine withdrawal syndrome in rats by adminstration of mu-delta-and kappa selective opioid antagonists. Neuropharmacology 1992,31:1231.

　　5 李红，杨良，徐仕文，等. 海洛因依赖者下丘脑-垂体-肾上腺轴功能改变. 中华内分泌代谢杂志 1995，11：87～87.

　　6 Nestler EJ, Under Siege. The brain on opiate. Neuron 1996,16:897～900.

　　7 Taglialatela G, Perez-Polo JR. Developmental profile of the hypothalamo-pitaitary-adrenal axis response to nerve growth factor. Neurosci Lett 1994,182:231～234.

　　8 Aloe L. Adrenalectomy decreases nerve growth factor in young adult rat hippocampus. Proc Natl Acad Sci USA 1989,86:5636～5640.

　　9 Joels M, Karten Y, De Kloet ER, et al. Corticosteroid effects on electrical properties of brain cells: temporal aspects and role of antiglucocorticoids. Psychoneuroendorcrinology 1997,22:81～83.