【摘要】 目的： 观察青风藤(QFT)对吗啡在离体豚鼠回肠中戒断反应的影响，以及对乙酰胆碱(Ach)引起豚鼠回肠收缩的影响，评价青风藤对吗啡依赖豚鼠回肠的作用。方法： 戒断性收缩由1    μmol·L-1纳络酮（Nal）加入已在含3 μmol·L-1吗啡（Mor）的37.5℃  Krebs液中孵育4 h的离体豚鼠回肠引起。 结果： 当QFT (0.04, 0.2, 1.0 g·L-1)在加入Nal 1 min前后给药，Nal催促的戒断性收缩被抑制,与Mor依赖对照组相比较有显著性差异（P< 0.05）； QFT (0.04, 0.2, 1.0 g·L-1)对Ach引起的正常豚鼠回肠收缩也有抑制作用，与Ach对照组相比较均有显著性差异（P< 0.05）；QFT的作用呈剂量依赖趋势。结论： 青风藤能够抑制Mor依赖的戒断症状。    

　　【关键词】 青风藤 吗啡 纳络酮 回肠 尼莫地平 乙酰胆碱

　　0 引言

　　中药青风藤(QFT)是防己科植物青藤Sinomenium acutum (Thunb.) et Wils. 及毛青藤S. acutum (Thunb.) Rehd. et Wils ， Var. cinereum（Diels）Rehd. et Wils.  的干燥藤茎，具有祛风通络，除湿止痛之功效。临床上主要用于治疗风湿痹痛、关节肿胀，麻痹搔痒等病症. 中药戒毒复方中使用QFT已收到较好的临床效果［1］。目前为止，国内外文献资料尚未见有关研究QFT抗阿片类戒断反应的实验报道。为探讨QFT在戒毒方面的应用价值，通过建立有效的豚鼠离体回肠模型［2］，观察QFT对纳络酮(Nal)催促的吗啡(Mor)依赖豚鼠回肠戒断性收缩的影响以及对Ach引起正常回肠收缩的影响。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

    青风藤（省药材站提供，经本校中药鉴定室鉴定为正品青风藤 ，水煎醇沉法制备1.0 kg·L-1的水提液，稀释成不同浓度） ，Mor（ 解放军总后勤部药品供应站），Nal（北京四环药厂），尼莫地平(Nim)（山东新华制药股份有限公司）。豚鼠（n= 20）,♂ ，体质量（310±33） g（由第四军医大学实验动物中心提供），实验前禁食12 h。PCLAB生物信号采集系统和JZ100型张力换能器（北京微信斯达科技发展有限责任公司）， DW5A自供液式恒温平滑肌槽（广东汕头教育医学仪器厂）。
 
　　1.2 方法

    取豚鼠（n=20），击头处死，立即剪开腹腔取出回肠，弃去近盲肠部约10 cm回肠后，置于冰冷的Krebs液中，用Krebs液冲去肠腔内容物，每只分别剪取3～4 cm的回肠段. 其中10只豚鼠回肠分别剪取6段，随机分到6个组中，观察药物对回肠催促戒断收缩的影响分组为: 正常回肠组、Mor依赖对照组、QFT（0.04，0.2，1.0 g·L-1）系列剂量治疗组及Nim对照组； 另10只豚鼠分别剪取5段，随机分到5个组中，观察药物对Ach引起收缩影响：Ach对照组、QFT（0.04，0.2，1.0 g·L-1）系列剂量组和阿托品(Atr)对照组。

    Mor依赖回肠标本的制备方法为：各回肠段悬挂于30 mL含3 μmol·L-1 Mor的Krebs液中，通入O2及CO2（φ：950 mL·L-1  vs 50 mL·L-1），37 ℃ 孵育4 h，15 min更换Krebs液，形成Mor依赖回肠标本. 将各回肠段悬挂于恒温平滑肌槽内含30 mL Krebs液的麦氏浴管中，通入O2及CO2（φ：950 mL·L-1 vs 50 mL·L-1 ），将回肠段下端固定于麦氏浴管底部钩上，上端轻轻地挂在张力换能器的金属片上，通过张力换能器与计算机连接，采用PCLAB生物信号采集系统记录回肠段张力的变化. 水浴温度37.5℃ ，每15 min更换一次Krebs液. 实验开始前，先使回肠标本在1 g静止张力下平衡15 min. 在含Mor依赖回肠标本的浴管中, 加入Nal 1 μmol·L-1， 即引起催促收缩反应。在加入Nal前、后1 min分别加入剂量0.04，0.2，1.0 g·L-1 QFT或0.3 μmol·L-1 Nim，观察药物对回肠催促戒断收缩的影响；在含正常豚鼠回肠标本的浴管中，加入10 μg·L-1 Ach引起收缩反应，在其加入前、后1 min分别加入剂量0.04，0.2，1.0 g·L-1的QFT或100 mg·L-1的Atr，观察药物对正常回肠Ach引起收缩的影响。
 
　　统计学处理： 以PCLAB生物信号采集系统中回肠收缩曲线张力的峰值作为观察指标，实验数据以Ach x±s  表示，应用SPSS 9.0统计软件进行单因素设计的方差分析。

　　2 结果

　　2.1 Mor依赖豚鼠回肠模型的戒断性

    收缩正常回肠组加入Nal不引起收缩，而Mor依赖回肠组加入Nal催促后，20 s内，即引起戒断性收缩，肠管张力明显增加，该收缩可维持5 min以上，与正常回肠组相比较P< 0.01，表明模型制作成功（Tab 1）. QFT系列治疗组均抑制Nal的戒断性收缩，使Nal引起的收缩张力降低，0.2，1.0 g ·L-1的剂量组与Mor依赖组比较P< 0.01,  0.04 g·L-1的剂量组亦有显著性差异（P<0.05），说明药物作用呈剂量依赖趋势（Tab 1）；Nim组亦抑制Mor依赖豚鼠回肠的戒断性收缩，与Mor依赖组比较P<0.01，与文献报道一致［2］。

　　2.2 对Ach引起的正常豚鼠回肠收缩的影响

    正常回肠组加入Ach即引起收缩，肠管张力明显增加；0.2, 1.0  g·L-1的QFT剂量组及Atr对照组均抑制Ach引起的收缩，与Ach回肠组相比较P< 0.01,  0.04 g·L-1的剂量组与其比较亦有显著性差异（P<0.05），说明QTF的作用呈剂量依赖趋势（Tab 2）。

　　表1 表风藤对纳络酮催促的吗啡依赖豚鼠回肠收容的影响（略）

　　Tab 1Effect of  QFT on Nalprecipitated ileum of morphine dependent guinea pig(略)

　　表2 青风藤对乙酸胆碱引起的豚鼠回肠收缩的作用（略）

　　Tab 2Effect of  QFT on  Achinduced contracture in isolated guinea pig ileum(略)

　　3 讨论

　　实验结果表明，QFT和Nim一样，能够对Mor依赖离体豚鼠回肠的催促戒断收缩产生明显的抑制和阻断效应，其剂量越大，抑制效果越明显；QFT能够降低Ach引起回肠收缩幅度，且呈剂量依赖关系. QFT对脑啡呔受体的抑制活性在75%以上，提示QFT可能通过阿片受体治疗Mor戒断症状 . QFT的主要有效成分青藤碱具有抗心律失常的作用，其机制是作用于跨膜离子转运，对Na+，K+，Ca2+的转运均有抑制作用 ，而Ca2+离子在阿片类依赖中的作用受到日益广泛的注意，在钙通道阻滞剂对阿片类戒断症状群的研究中，许多实验证明，钙通道阻滞剂通过中枢和外周两种机制调节外Ca2+ 内流，缓解阿片类依赖戒断症状， 国内外许多学者在离体豚鼠回肠标本上已证实Nim、异博定等钙通道阻滞剂可以阻断Mor戒断所引起的戒断性收缩［2］，近年来应用钙拮抗剂治疗阿片类依赖的药理研究报道日益增多［3-6］。本实验中，QFT对Mor依赖豚鼠回肠戒断收缩的抑制作用，可能与其Ca2+阻滞作用有关. Ach能系统兴奋在Nor戒断反应中所起的作用与去甲肾上腺素能神经元相似，胆碱能受体阻断剂能减轻戒断症状 ，非选择性M受体拮抗剂能阻断Nor依赖大鼠Nai激发的戒断症状［7］。本实验中，QFT阻断Ach引起的肠管收缩，表明QFT可作用于M胆碱受体，提示该作用可能是QFT治疗Mor戒断的另一作用机制，也为治疗阿片依赖的腹泻症状提供了依据。总之，中医药戒毒是一种具有中国特色的戒毒方法，具有广泛的发展前景，对戒毒中药单味药的研究，可以帮助寻找快速、低毒、无瘾的中药单体和活性成分，是中医药向现代化发展的要求。

　　【参考文献】

　　［1］  Mo ZX, Zhang P, Zheng YS, Yu LZ. Therapeutic effect of fuzhengkang on withdrawal syndromes in morphinedependent rats and mice ［J］. Zhongguo Yaowu Yilaixing Zazhi (Chin J Drug Depend), 2000;92:100-103.

　　［2］  Liu ZH, Li JL, Li N, Tian CL, Zhang KG.  Effect of tetrandrine on morphine dependence in isolated guinea pig ileum ［J］.  Acta Pharmacol,  2000;20(11):1000-1004.
 
　　［3］  Blackburn Munro G, Brown CH, Neumann ID, Landgraf R, Russell JA. Verapamil prevents withdrawal excitation of oxytocin neurones in morphinedependent rats ［J］. Neuropharmacology, 2000;39(9):1596-1607.

　　［4］  Kishioka S, Ko MC, Woods JH. Diltiazem enhances the analgesic but not the respiratory depressant effects of morphine in rhesus monkeys ［J］. Eur J Pharmacol, 2000;397(1):85-92.

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