摘要 目的：用小鼠和大鼠对双氯芬酸钾(DK)原粉进行镇痛、抗炎的药效作用及急性毒性评价。方法：角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法，二甲苯致小鼠耳廓肿胀法，热板法及扭体法。结果：抗炎试验结果显示，单次口服DK5.0～20.0　mg.kg－1对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的抑制作用显著(P＜0.05或，P＜0.01)，镇痛试验结果显示，单次口服DK2.5～10.0mg.kg－1对小鼠热板法和扭体法呈显著或非常显著性镇痛作用(P＜0.05或P＜0.01)，其抗炎和镇痛作用均明显强于阳性对照药扑炎痛。同时，对DK原粉的急性毒性试验结果显示，给予小鼠灌胃的LD50为（160.04±43.49）mg.kg－1，与腹腔注射途径所得LD50(182.58±30.64)mg.kg－1无显著差异。

    关键词 双氯芬酸钾 扑炎痛 抗炎作用 镇痛作用 LD50

　　双氯芬酸钾(diclofenac potassium,DK)与双氯芬酸钠(DS)均为双氯灭芬酸的不同盐制剂，为一强效抗炎、镇痛、解热剂。并具良好的胃肠道耐受性。适用于风湿性关节炎、骨关节炎、神经炎、红斑狼疮、关节强直性脊柱炎、癌症、手术后引起的疼痛及各种原因的发热［1］。两者的差异在于DK的药代动力学特征显示其口服吸收迅速完全，达峰时间为1小时左右，较钠盐(2小时)快［2］。

    1　实验部分

    1.1　材料

　　SD大鼠体重(140±10)g；昆明种小鼠，体重(20±2)g(四川抗菌素工业研究所)。DK粉剂(纯度99.33%，批号960901，西南合成制药厂)临用前以1%羧甲基纤维素液溶解配制；羧甲基纤维素(CMC，批号951011，上海化学试剂采购供应站)；扑炎痛片(规格每片0.3 g，批号970104，成都制药二厂)临用前配制同DK。角叉菜胶(批号960811，辽宁省药物研究所)。

    1.2　方法与结果

    1.2.1　DK对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响　取SD大鼠，试验前一天禁食不禁水，并于试验前半小时灌水5 ml，随机分为5组，每组8只，♀♂各半。第1～3组为药品组，分别灌服0.025%、0.05%、0.1%DK5.0、10.0、20.0mg.kg－1；第4组为阳性对照组，灌服0.1%扑炎痛20.0mg.kg－1；第5组为阴性对照组，灌服1%CMC溶液2.0 ml.10 g－1。各组在给药同时自各鼠左后足跖中部皮下注射1%角叉菜胶0.1 ml，于注射后30、60、120、240、360 min用容积测量法测定足跖肿胀程度，计算各组肿胀率(表1)。

　　由表1可见，与阴性对照组比较，DK与扑炎痛对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀均有明显抑制作用。DK在10.0 mg.kg－1时(给药120～240 min)，出现显著抑制作用(P＜0.05)；360 min后抑制作用消失；给药20.0 mg.kg－1，30 min时便出现显著抑制作用，120～240　min时作用非常显著(P＜0.01)。扑炎痛在给药120～240 min时亦有明显抑制作用(P＜0.05)，但与相同剂量DK比，DK抑制作用显著强于扑炎痛，说明DK有显著抗炎作用。

表1　DK对角叉菜胶所致鼠大足跖肿胀的影响

Drugs	Dose/mg.kg－1	致炎后足跖体积-致炎前足跖体积/ml
		30 min	60 min	120 min	240 min	360 min
DK	5.0	0.28±0.15	0.34±0.12	0.29±0.13	0.25±0.12	0.35±0.20
	10.0	0.21±0.16	0.30±0.13	0.26±0.10	0.20±0.10*	0.33±0.12
	20.0	0.12±0.08*	0.15±0.07*	0.19±0.07**	0.18±0.05**	0.27±0.11
Benorilate	20.0	0.24±0.14	0.28±0.15	0.25±0.15*	0.19±0.17*	0.26±0.24
1%CMC	0.2ml.(10g)－1	0.26±0.13	0.31±0.12	0.42±0.14	0.37±0.12	0.33±0.14

*P＜0.05,**P＜0.01

    1.2.2　对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响　取小鼠40只，试验前一天禁食不禁水，随机分为5组，每组8只。第1～3组为药品组，分别按“1.2.1”项下灌服；第4组为阳性对照组，灌服1%扑炎痛10.0 mg.kg－1；第5组为阴性对照组，灌服1%CMC溶液0.2 ml.(10 g)－1。各组给药后45 min分别于各鼠左耳前后和0.05～0.1ml二甲苯涂抹，隔30min后将小鼠脱臼处死，每鼠取左、右两耳，用8 mm直径打孔器分别自左、右耳相同部位打下耳片，用电子天平称重，计算出左耳肿胀程度及药物抑制率，DK对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响结果经统计处理见表2。由表2可见，与阴性对照组比，DK和扑炎痛均有明显抑制鼠耳肿胀作用，与相同剂量扑炎痛比，DK的抑制作用明显强于扑炎痛(P＜0.01)。DK在5.0 mg.kg－1时即产生显著作用(P＜0.05)，且抑制率随剂量增加而明显增高，说明DK具有显著的抗炎作用，且强于扑炎痛。

表2　DK对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响

Drags	Dose/mg.kg－1	耳片重量(mg)(左耳-右耳)	抑制率
DK	2.5	8.1±2.6	34.1
	5.0	5.1±3.2*	58.1
	10.0	3.4±2.1**	72.4
Benorilate	10.0	7.1±2.5*	42.3
1%CMC	0.2ml.(10g)－1	12.3±4.5	-

*P＜0.05　**P＜0.01

    1.3　镇痛作用

    1.3.1　DK对小鼠热板法的镇痛作用　取合格痛阈值(30 s内舔后足者)小鼠75只，试验前一天禁食不禁水，随机分为5组，每组15只，分别测定各鼠痛阈值。第1～3组为药品组，分别按“1.2.1”项下灌服；第4组为阳性对照组，灌服1%扑炎痛20.0 mg.kg－1；第5组为阴性对照组，灌服1%CMC溶液0.2　ml.10g－1。各组分别在给药前后30、60、90 min测定各鼠痛阈值并记录，计算出各组给药后痛阈延长时间，给药后痛阈值-给药前痛阈值见表3。

表3　DK口服对小鼠热板法的镇痛作用比较

Drugs	Dose/mg.kg－1	给药后痛阈时间(min)
		30	60	90
DK	2.5	5.16±2.30**	9.82±6.85**	7.67±6.15**
	5.0	8.36±4.65**	12.84±15.79**	10.54±5.15**
	10.0	14.58±10.69**	19.08±14.96**	16.22±13.44**
Benorilate	20.0	6.21±5.15**	10.5±10.03**	8.76±6.15**
1%CMC	0.2ml.(10g)－1	1.56±1.30	1.88±1.20	2.01±1.64

**P＜0.01

　　由表3可知，DK和扑炎痛具有显著镇痛作用(P＜0.01)，DK更为明显。即该药在2.5 mg.kg－1时便显著延长痛阈时间(P＜0.01)，与20.0 mg.kg－1扑炎痛所致的痛阈延长时间相当。说明DK镇痛作用明显强于扑炎痛。

    1.3.2　DK对小鼠扭体法的镇痛作用　取小鼠75只，随机分为5组，♀♂各半，试验前一天禁食不禁水。第1～3组为药品组，分别按“1.2.1”项下灌服；第4组为阳性对照组，灌服0.1%扑炎痛20.0 mg.kg－1；第5组为阴性对照组，灌服1%CMC溶液0.2 ml.(10g)－1。各组分别于给药后60 min腹腔注射0.6%醋酸每只0.2 ml，观察10 min内各组出现扭体反应小鼠数(以10 min内出现三次以上扭体反应的小鼠只数进行统计)。记录并计算出各组镇痛抑制率(表4)。由表4可知，DK与扑炎痛均具明显镇痛作用。其镇痛抑制率显著高于阴性对照组。DK在5.0 mg.kg－1时的镇痛作用与20.0　mg.kg－1扑炎痛相当(P＜0.05)，在10.0 mg.kg－1时出现显著作用(P＜0.01)，说明DK作用较大。

表4　DK口服对小鼠醋酸刺激(扭体法)的镇痛作用

Drugs	Dose/mg.kg－1	rats	扭体数(只)	抑制数(%)
DK	2.5	15	9	40.0
	5.0	15	7	53.3*
	10.0	15	5	66.7**
Puyantong	20.0	15	6	60.0*
1%CMC	0.2ml.(10g)－1	15	13	13.3

*P＜0.05　**P＜0.01

    1.4　急性毒性试验

　　将小鼠按体重随机分为灌胃组5组，腹腔注射组5组，每组10只。分别灌服或腹腔注射不同剂量DK0.2 ml.(10g)－1体重，灌服最高剂量为350.0　mg.kg－1，组距为0.7，腹腔注射最高剂量为250.0mg.kg－1，组距为0.8。给药后立即观察动物反应情况，并继续观察2周，记录动物毒性反应及死亡情况。两种途径给药后小鼠均出现自发活动减少，并呈昏睡状，尤以腹腔注射为甚，但30～60 min后逐渐恢复活动，于次日才开始出现死亡，5天后仍有部分死亡，死亡鼠经解剖见腹腔注射脏器有刺激性发红，其余未见异常。结果经Bliss法计算见表5。

表5　DK对小鼠灌胃和腹腔注射的LD50

受试药剂量(mg/kg)	对数剂量(X)	动物数(只)	死亡动物(只)	死亡率(%)	机率单位(Y)	LD50/mg.kg－1
350.0	2.544	10	10	100	7.40
245.0	2.389	10	7	70	4.05	160.04±43.19
171.5	2.234	10	6	60	4.01
120.0	2.079	10	4	40	3.92
84.0	1.924	10	0	0	2.60
250.0	2.398	10	9	90	4.12
200.0	2.301	10	8	80	4.08	182.579±30.64
160.0	2.204	10	2	20	3.83
128.0	2.107	10	0	0	3.72	95%可信限

　　结果显示，DK灌胃的LD50为(160.04±43.49)mg.kg－1、(122.25 mg.kg－1～209.34 mg.kg－1,95%可信限)，腹腔注射LD50为(182.579±30.64)mg.kg－1、(154.49～215.77)mg.kg－1,95%可信限)。两种给药途径无明显差异(P＞0.05)，说明DK口服吸收好。

    2　讨论

　　文献［4］报道，DS治疗指数较高，分别是萘普生的30倍以上，保泰松的10倍左右，吲哚差辛的30倍以上，因而使用安全。试验用小鼠对DK的LD50测定结果显示，口服给药为160.04 mg.kg－1，腹腔注射为182.79 mg.kg－1，如与以上试验抑制53.5%的小鼠的扭体反应的镇痛剂量比，其治疗指数估计为31倍左右。因而，DK亦是十分安全有效的的镇痛剂。

　　实验应用各种模型对DK的抗炎、镇痛作用进行测定比较，结果抗炎、镇痛作用均强于扑炎痛。上述结果与文献报道的DS作用相似［5］。说明DK同样是安全、有效的强效镇痛剂。

    参考文献：

    ［1］陈新谦，金有豫.新编药学物［M］.第14版.北京：人民卫生出版社.1997.158

    ［2］卓海通，卡德尔，凌树森，等.口服双氯芬酸钾胶囊剂药代动力学及生物利用率研究［J］.中国临床药理学杂志，1998，14(1)∶44

    ［3］Brogden RN,Hell RC,Pakes GE,et at.Diclofenac sodium:A review of its pharmacological properties［J］.Drugs,1980,20∶24

    ［4］Menasse R,Hedwall PR,Kraetz J,et al.Pharmacological properties of diclofenac sodium and its metabolytes［J］.Scand J Rheumatol,1978,22(supple)∶5

    ［5］Dietrich WS,Edmono CKU.Pharmacology of Diclofenax sodium［J］.The American J of Med,1986,80(supple 4B)∶35