关键词   褪黑素； 镇痛； 身体依赖性； 小鼠

褪黑素（melatonin, MT）是松果腺分泌的一种重要的神经内分泌活性物质，化学结构为N－乙酰－5－甲氧基色胺， 现能人工化学合成。MT有着广泛的生理、药理作用， 具有重大的学术价值和使用价值[1,2]。动物行为测痛试验表明，MT具有显著提高动物痛阈作用，并呈量效及时效关系[3,4]；临床观察表明，MT可使丛集性头痛患者疼痛指数明显下降[5]。但是有关MT是否具有依赖性，国内外尚未见文献报道。本文采用热板法观察MT对小鼠的镇痛作用，在此基础上采用小鼠跳跃试验和竖尾试验探讨MT对小鼠是否有致身体依赖性作用。

1  材料与方法

1.1 动物

   昆明种小鼠，由福建医科大学实验动物中心和福建中医学院动物中心提供，光暗周期12/12 h，自由饮水饮食。

1.2 药品

   MT, Sigma公司产品，临用前无水乙醇溶解，再加生理盐水配制，使乙醇的浓度为5％；盐酸吗啡注射液，沈阳第一制药厂产品，批号900805；盐酸纳洛酮粉剂，Sigma公司产品。

1.3 方法

1.3.1 热板法[3]   用GJ－8402热板测痛仪测定小鼠痛阈，热板温度维持在55 ℃±s 0.5 ℃，自动记录自小鼠足底接触热板至出现舔后足的时间（单位秒），即热板反应潜伏期作为痛阈指标。实验时先剔除反应潜伏期（基础痛阈）>30 s或<5 s的反应迟钝或过敏小鼠；用药后小鼠潜伏期>60 s 者停止实验并以60 s计。实验时室温维持在23－25 ℃。

1.3.2 小鼠跳跃反应试验[6]   小鼠sc吗啡或MT，对照组sc 5％乙醇生理盐水溶媒，d1注射5次(9:30,10:30,11:30 am; 1:30, 3:30 pm)，d2注射2次(9:00,11:00 am)。吗啡组小鼠起始剂量为2.5 mg·kg－1,此后按5,10,20,30,40,50 mg·kg－1剂量递增；MT组小鼠起始剂量60 mg·kg－1，此后每次剂量分别递增15 mg·kg－1或25 mg· kg－1。于最后一次给药后2 h ip纳洛酮10 mg·kg－1，记录10 min内各小鼠跳跃反应次数。

1.3.3 小鼠竖尾试验[7]   小鼠ip吗啡或MT，观察给药后2 h小鼠有无出现S形竖尾反应。

1.4 数据处理

   各组数据以x±s表示，采用样本均数t检验比较两组的显著性差异。 

2  结果

2.1 MT对小鼠的镇痛作用

   32只♂小鼠，体重25.9 g±s 2.8 g（x±s，下同），随机分为4组（n=8）,分别ip不同剂量MT，对照组则ip等量5％乙醇生理盐水，用热板法测定给药前后的小鼠痛阈，结果见表1。表中显示，MT可显著延长小鼠的热板反应潜伏期，并呈量效关系；ip 80 mg·kg－1 MT 1 h后可使小鼠痛阈提高270％，提示MT对小鼠具有显著的镇痛作用。

2.2 小鼠跳跃反应试验结果

   ♂小鼠40只，体重19.2 g±s 1.4 g, 随机分为4组（n=10），分别sc吗啡或MT，对照组sc 5％乙醇生理盐水。各组ip纳洛酮后小鼠跳跃反应结果见表2。结果表明，吗啡组小鼠在ip纳洛酮后出现显著的跳跃反应，而MT组则无。

2.3 小鼠竖尾反应试验结果

   小鼠40只，♀♂各半，体重18.8 g±s 1.2 g，随机分为4组，每组10 只，分别ip 45，90, 180 mg·kg－1及吗啡15 mg·kg－1，结果可见吗啡组小鼠于给药2 h内兴奋跑动，均出现S形竖尾反应；而MT组小鼠都无竖尾反应，外观安静少动并随着剂量增大而增强。

3  讨论

自从1958年Lerner从牛松果腺提取分离获得MT以来，人们对其展开了大量的研究，进展显著[1,2] 。在数十年基础研究的基础上，近年来人们开始重视其实际应用价值，如有人试图将其开发成为催眠药物[7]，其他方面作用也有其应用前景[2]。本文观察了MT对小鼠的镇痛作用，并探讨其对小鼠是否存在身体依赖性作用。

动物行为测痛试验表明，MT可显著提高小鼠痛阈，并具有明显的剂量和时间依赖关系，但是在同一动物测痛模型（热板法）上有效的镇痛剂量波动较 大[3,4,8]，这可能与小鼠鼠龄，实验时间等实验条件有关。本文结果表明ipMT可显著提高小鼠痛阈，其效应强度及有效的镇痛剂量与Lakin等人的报道[3]是相近的。

有报道MT5 mg·kg－1·d－1治疗丛集性头痛患者，连续60 d可使疼痛指数下降，未见明显的毒副作用[5]，提示MT无耐受性和依赖性。本文采用较为常用的验证药物有无身体依赖性的小鼠动物两个模型—小鼠跳跃反应试验和小鼠竖尾试验，证实了MT对小鼠无致身体依赖性作用。此外，丁长海等人报道MT对小鼠的镇痛作用无耐受性[9]，表明MT的镇痛作用可能有别于阿片类镇痛药。另外，MT尚有显著提高免疫功能作用[2,9]，也有抗肿瘤和降低常规抗肿瘤药毒性的良好作用[10]，且其毒性非常小[4]，因此有望开发成为一种新型镇痛药，尤其适用于肿瘤患者的疼痛治疗。 

4  参考文献 

1  戴兰馥. 松果体中褪黑素的研究概况. 国外医学药学分册, 1988，15:321－327.

 2  魏  伟,徐叔云. 褪黑素的神经内分泌免疫作用及其应用前景. 中国药理学通报, 1997，13:196－200.

 3  Lakin ML, Miller CH, Stott ML, et al. Involvement of the pineal gland and melatonin in murine analgesia. Life Sci, 1981，29:2543－2551.

 4  Sugden D. Psychopharmacological effects of melatonin in mouse and rat. J Pharmacol Exp Ther, 1983，227:587－591.

 5  Maestroni GJM. The immunoneuroendocrine role of melatonin. J Pineal Res, 1993，14:1－10.

 6  常志青,王树玲, 刘  峰, 等. 茵芋碱对小鼠、大鼠和猴无身体依赖性. 中国药理学报，1982，3:223－226.

 7  Zhdanova IV, Wurtman RJ, Lynch HJ, et al. Sleep－inducing effects of low doses of melatonin injected in the evening. Clin Pharmacol Ther, 1995，57:552－558.

 8  丁长海，郝吉庆，魏  伟，等. 褪黑素和哌替啶对小鼠的镇痛作用比较. 安徽医科大学报，1995，30：180－182.

 9  丁长海， 魏  伟， 郝吉庆，等. 褪黑素和哌替啶的耐受性及对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响. 中国药理学通报，1995，11:309－311.

10 Blask DE, Wilson ST, Lemus－Wilson AM. The oncostatic and nocomodulatory role of the pineal gland and melatonin. In: Maestroni GJM, Conti A, Reiter RJ, eds. Advance in pineal research. London: John Libbey, 1994.235－241.

STUDIES ON THE ANALGISIC EFFECT AND PHYSICAL

 DEPENDENCE OF MELATONIN IN MICE

Yu Changxi, Weng Shengmei, Chen Chonghong

(Department of Pharmacology, Fujian Medical University, Fuzhou, 350004)

ABSTRACT  The analgesic effects and physical dependence of melatonin in mice were demonstrated. In the hot－plate test, it was observed that the mice treated with melatonin (ip, 20, 50, 80 mg·kg－1) showed a dose－related analgesic response. In the test of jumping－response in mice, the mice received 7 injections (sc) of melatonin or morphine, followed by naloxone 10 mg·kg－1(ip). Marked jumping was precipitated with naloxone after morphine, but not after melatonin (735 or 945 mg·kg－1). In mice, ip melatonin 45 or 90 or 180 mg·kg－1 exhibited a sedative effect, while ip morphine 15 mg·kg－1 caused a significant Straub's tail reaction and motor activity. These results indicate that melatonin has a significant analgesic effect without producing physical dependence in mice and it may be a new and effective analgesic drug.

KEY WORDS  melatonin; analgesia; physical dependence; mice

收稿日期：1997－10－25